流动相对色谱峰形与保留值的影响.pptVIP

流动相对色谱峰形及保留值的影响 pH 应用反相高效液相色谱进行分析测定时，常常采用离子抑制法即向含水流动相中加入酸、碱或缓冲溶液等改性剂，以使流动相的pH值控制一定数值，抑制溶质的离子化，减少谱带拖尾、改善峰形，以提高分离的选择性。例如在分析有机弱酸时，常向流动相中加入磷酸(或乙酸、三氯乙酸、甲酸、硫酸)，就可抑制溶质的离子化，获对称的色谱峰。对于弱碱性样品，向流动相中加入三乙胺，也可达到相同的效果。方法建立时最好选用pH 微小改变不影响分离的流动相，pH值的较大变化往往会对分析结果产生很大影响，因此流动相pH值 的调节是分析过程中至关重要的一个环节。 将常用药物按它们对流动相pH值变化的保留值函数特征分成碱性、酸性和中性三类, 有利于从宏观上把握药物的色谱行为趋势, 可以有预见性地规划分离条件的选择, 减少不必要的实验条件和实验次数, 对内标物的选择及分离度的改善和保留值的增减趋势均可作出事先的判 断, 这对在药物分析实践中有指导意义。 式中k′p 、k′p + 1是pH 值分别为p 、p + 1 时的容量因子, n 为pH 2-5 时的pH 值, Sp 、Spn为流动相pH 值增加±1 时药物容量因子的响应系数和平均响应系数。 定义: Spn 0.1 ,物质为碱性,保留值随pH 值增加而增加; Spn - 0.1 ,物质为酸性,保留值随pH 值增加而