链霉菌GEMSM4中聚酮合酶和非核糖体多肽-华中农业大学学报.PDF

第 卷 第 期 华 中 农 业 大 学 学 报 ３４ ４ 　 　 　 　 　 　 　 Vol．３４　No．４ 年 月 , ２０１５ 　７ JournalofHuazhon A riculturalUniversit Jul２０１５７３~７９ g g y y 链霉菌GEMSM4(6) 中聚酮合酶和非核糖体 多肽合成酶基因的筛选及克隆 李 娜 黄 胜 何 璟 　 　 　 　 　 , 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室 武汉 ４３００７０ () , 摘要 链霉菌 的发酵产物具有抗革兰氏阳性菌和阴性菌的活性 同时还对酵母及丝状真菌 　 GEMSM ４６ , . 尤其是植物病原菌 具有较强的抑制作用 本研究利用简并性引物对该链霉菌基因组中可能存在的聚酮合酶 ( ) ( ) , 和非核糖体多肽合成酶 基因进行 扩增及序列分析 找到了 个 及 个 基因的 PKS NRPS PCR ３ NRPS １５ PKS , , ; 片段 其中 基因与 的 基因序列同源性最高 达到 而 PKS Stretom cesviolaceusnierTu４１１３ PKS ９１％~９９％ p y g . , NRPS基因与数据库中已知的NRPS基因序列同源性仅为６０％~６２％ 为克隆NRPS生物合成基因簇 构建了 () ( ) , 链霉菌 的基因组细菌人工染色体 文库 通过 筛选得到包含有这 个 基因的克 GEMSM ４６ BAC PCR ３ NRPS , . 隆子 为后期的异源表达及基因组发掘分析提供基础 ; ; ; ; 关键词 链霉菌 聚酮合酶 非核糖体多肽合成酶 简并性引物 细菌人工染色体文库 　 中图分类号 文献标识码 文章编号 ( ) 　Q９３９．９　　 　A　　 　１０００Ｇ２４２１２０１５０４Ｇ００７３Ｇ０７ , , ) . 　　放线菌是次级代谢产物的主要来源 目前发现 somaletidesn