高效液相色谱法测定饮料中咖啡因的含量.PDF

高效液相色谱法 测定饮料中咖啡因的含量 一、实验目的 1 、学会用高效液相色谱法测定饮料中咖啡因的含量。 2 、掌握高效液相色谱法定性和定量分析的基本方法。 二、实验原理 咖啡因又称咖啡碱，是从茶叶或咖啡中提取而得到 的一种生物碱，属黄嘌呤衍生物，化学名称为 1,3,7- 三甲基 黄嘌呤。咖啡能刺激人体大脑皮层，导致精神兴奋。咖啡中 含咖啡因约为 1.2~1.8% ，茶叶中约含咖啡因2.0~4.7% 。可 乐饮料、 APC 药片（阿司匹林）等中均含咖啡因。其分子 O 式为 C H O N ，结构式为： CH3 8 10 2 4 H C 3 N N O N N CH 3 传统测定方法： 传统测定咖啡因的方法—主要采用萃取分光光度法 优点：方法简单 缺点：由于提取组分中含有大量与咖啡因具有类似紫外吸收 的杂质同时存在，给测定结果造成较大误差。 反相高效液相色谱法： 优点： 将饮料中与咖啡因类似紫外吸收的组分，如单宁酸、 咖啡酸、蔗糖等进行分离后再测定，消除了杂质的 干扰，测定结果更加准确、可靠。 缺点： 要求准确定量进样 定量分析方法—标准曲线法 1 、将咖啡因的纯品—配制成一系列不同浓度的标准溶液。 2 、对不同浓度的标准溶液进行准确的定量进样，得到一系列 不 同峰面积或者峰高的色谱图。 3 、以峰面积或者峰高对相应的浓度绘制标准曲线。 4 、在与绘制标准曲线时完全相同的操作条件下，对未知浓度 强度 浓度 线性 (浓度) 样 12000 10000 y = 941.13x + 226.8 2 R = 0.994 8000