二色补血草组织培养快速繁殖技术的研究.docVIP

二色补血草组织培养快速繁殖技术的研究 　　摘要:对二色补血草组培快繁技术进行研究,结果表明,以MS培养基中加入6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.2 mg/L的激素组合处理后的叶丛增殖倍数最大,达2.94。生根培养时以采用不含IBA的培养基为宜,生根率可达80%。经强光直射炼苗的二色补血草试管苗的移栽成活率达到82.5%,显著高于未经强光炼苗的试管苗移栽成活率。 　　关键词:二色补血草;组织培养;快速繁殖 　　中图分类号:S567.9文献标识码:A DOI编码:10.3969/j.issn.1006-6500.2010.02.008 　　 　　Studies on Tissue Culture and Rapid Propagation of Limonium bicolor 　　CHAI Ci-jiang, SHI Yan-shan, LUO Jian-xia, WANG Dan, YAN Mo-lin 　　(Department of Horticulture,Tianjin Agricultural College,Tianjin 300384,China) 　　Abstract:The technology of tissue culture and propagation of Limonium bicolor was studied. The results showed that the leaf bunch increased 2.94 times that was the biggest one among the treatment in the MS medium with1.0 mg/L 6-BA and 0.2 mg/L NAA added. The rooting rate of the leaf bunch of Limonium bicolor in vitro could arrive 80.0% in the MS medium without IBA. With acclimating by sunlight irradiating, 82.5% of the Limonium bicolor plantlets survived after transplanted. This survival rate was higher obviously than that with no acclimation by sunlight irradiating. 　　Key words: Limonium bicolor; tissue culture; rapid propagation 　　 　　二色补血草(Limonium bicolor)是蓝雪科补血草属植物,枝干挺拔,花色艳丽,被人称为“干枝梅”,是理想的天然干花材料,同时又是药用植物,并且是盐碱化较为严重地区的理想绿化植物。但近年来,由于旅游热和草原环境的不断恶化,加之人们的过度采折使其资源面临濒危。二色补血草以种子繁殖为主,但繁殖率低,且后代易发生变异。采用组织培养方法进行二色补血草无性系快速繁殖,对于保护和开发二色补血草资源具有重要意义,但国内关于这方面的研究仅见到少量报道[1-3]。本研究对二色补血草的组织培养快繁技术进行了探讨,以便为完善该项技术提供依据。 　　 　　1材料和方法 　　 　　 　　在5月份二色补血草花茎伸长后,剪取花茎为外植体,自来水洗净浮土,在无菌环境中先用70%的酒精浸泡20～30 s,再放入0.1%升汞中浸泡6 min,后用无菌水冲洗3～4次,放入带滤纸的培养皿中,剪取约1 cm长的带分叉的花茎茎段为外植体,接入培养基进行初代培养,培养3～4周后在花茎茎段的分叉处可形成叶丛,取叶丛进行继代培养。初代培养基和继代培养基均为MS培养基附加蔗糖3%、6-BA 1.0 mg/L和NAA 0.1 mg/L。继代4代后取叶丛作为试材,进行以下试验。 　　1.1 BA与NAA激素配比对二色补血草叶丛分化增殖影响的研究 　　基本培养基为MS培养基,附加3%的蔗糖,在基本培养基中分别加入不同浓度配比的6-BA和NAA,激素配比共设6-BA1.0 mg/L与NAA0 mg/L、6-BA1.0 mg/L与NAA0.1mg/L、6-BA1.0 mg/L与NAA0.2 mg/L、6-BA1.0 mg/L与NAA0.3 mg/L 4个处理。上述每处理每瓶接种4个叶丛(每叶丛具有3～5个叶,下同),每处理接种10瓶,接种后于培养室培养,培养温度20～28 ℃,光照1 500～3 000 lx,培养30 d后调查叶丛增殖数量,并作统计分析。 　　 　　1.2不同IBA浓度对二色补血草叶丛生根