植物组织培养单元三植物组织培养的基本技术.pptxVIP

单元三 植物组织培养的基本技术;;掌握外植体的选择原则及处理方法； 理解植物组织培养方法及条件； 了解培养基的成分和种类。;第一节 培养基及其配制（掌握） 第二节 外植体的选择与消毒（掌握） 第三节 灭菌消毒技术（重点） 第四节 接种与培养技术（掌握）;第一节 培养基及其配制;培养基—人工配制的，能满足不同材料生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质。;*完整植株以自养方式建造自身。 *外植体不能自养。不能直接利用环境中的光和CO2合成碳水化合物，需要吸收营养。;;（一）水分;（二）无机盐;;（三）有 机物;椰乳： 促愈伤组织和细胞培养，用量10～20%。;马铃薯提取液： 对PH值缓冲大，用量150～200g/L，使苗壮。;（四）植物激素;1.生长素类 （1）种类：IAA　NAA　IBA　2,4－D （2）作用：诱导愈伤组织和根分化，促进细胞分裂和伸长。 （3）浓度：0.1－5mg/L （4）强弱：2,4－D ＞ NAA ＞ IBA ＞ IAA;2.细胞分裂素（CTK） （1）种类：6－BA、KT、ZT、TDZ、 2-iP （2）作用：诱导不定芽分化和茎、 苗增殖。 （3）浓度：0.05－10.0mg/L （4）强弱： TDZ ＞ZT ＞2-iP ＞6-BA ＞KT;生长素;3.赤霉素（GA3）　 （1）种类：GA3 （2）作用：促茎伸长，促胚发育成植株；打破休眠；一般在器官形成后加入。 注意：不耐热。 ;（五）培养体支持材料;六、辅助性物质;抗生素;　　　　抗氧化物;　活性炭;二、 培养基的种类及特点; 培 养 基 种 类;基本培养基种类 ;三、 培养基的配制;组成成分 ;（一）母液配制与保存;激素母液;;;结晶;量母液 ;四、培养基的灭菌 （高压蒸汽灭菌）;3、温度控制： 当锅内压力升至1.1kg/cm2时，计时15－20分钟，计时结束后，关闭电源。 4、出锅： 当灭菌锅自然冷却后，取出培养基，放置于接种室备用。 ;容器的体积（mL）;第二节 外植体的选择与消毒;一、外植体选择原则;;三、外植体的消毒;外植体表面灭菌;第三节 灭菌消毒技术;;一、物理消毒灭菌;;1.湿热灭菌;培养基高压灭菌所必需的最少时间 ;a. 高压蒸气灭菌;;放气阀;b. 常压蒸气灭菌;灭菌池;2.干热灭菌;使用：（烘箱） 1.器皿包扎，温度160 ℃ 。 2.70 ℃以下开箱。 3.勿超过180℃。 4.灭菌后的器皿用具随用随开包。;（二）紫外线杀菌;便携式;（三）过滤除菌;二、化学消毒灭菌;（一）常用的消毒剂;2.氧化剂;二氧化氯： 常温下为气体，杀菌作用强，对人体无毒害。;3.还原剂;4.表面活性剂;石炭酸：3%~5%浸泡或喷雾;5.其他消毒剂;多菌灵：高效低毒、光谱杀菌。 使用：0.1%拌料。;灭菌剂;（二）化学消毒剂使用方法;2.喷雾;3.擦拭;4.浸泡;难点;第四节 接种与培养技术;一、接种;关键——;二、培养;通气性较好，便于操作，但营养分布不均，生长发育不一致。;培养条件; 桃胚在2-5℃条件处理，有利于提高胚培养成活率。 ;2、光照;（1）光照强度 ;对光的要求还要根据不同的培养目的确定;（2）光质 ;（3）光周期 ;;3、湿度 ;（1）容器内;（2）容器外;4、气体;思考：;查资料：;作业 1、复习。 2、课后作业：1、4、12