高三生物一轮复习——基因工程的基本操作程序幻灯片.pptVIP

获得转基因生物的过程？;☆ 选修3 ☆现代生物科技专题 ;考纲考情;点击真题;基因工程操作的基本程序 1．目的基因的获取途径 (1)直接分离：从自然界已有的物种中分离，如从基因文库中获取。 (2)人工合成目的基因 常用的方法有： ①已知核苷酸序列的较小基因，直接利用DNA合成仪用化学方法合成，不需要模板。 ②以RNA为模板，在逆转录酶作用下人工合成。;(3)PCR技术与DNA复制的比较;;2.基因表达载体的构建 (1)基因表达载体的组成：启动子、目的基因、终止子以及标记基因等。 (2)基因表达载体的构建方法 ;3．将目的基因导入受体细胞;　　4.目的基因的检测与鉴定 (1)分子水平检测 ①导入检测：DNA分子杂交技术，即使用放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段作探针检测。;(2)个体生物学水平鉴定：对转基因生物进行抗虫或抗病的接种实验。; (2010年北京海淀区抽查)下图是含某目的基因的DNA片段，据图回答下列问题。 ;(1)根据图示可知，若用EcoRⅠ和SmaⅠ限制酶切割，则此DNA片段可有_____个限制酶切割位点，切割后共有____种____个切割末端。 (2)EcoRⅠ限制酶切割后形成的末端是_____末端，在图中用笔标出切割部位。 (3)如果要将用EcoRⅠ限制酶切割形成的目的基因片段导入受体细胞，一般需要_____作载体。其应具备的特点有：_____、___、___。 (4)E·coli DNA连接酶连接目的基因和载体时连接的是图中____(填字母)部位的化学键。 ;【答案】　(1)3　2　6(不计算原有的) (2)黏性 (3)质粒　至少有一个切割位点　能自我复制　含标记基因 (4)X; (2009年江苏高考题)苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。 ;(1)将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有________种DNA片段。 (2)图中②表示HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得________种重组质粒；如果换用BstⅠ与BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得________种重组质粒。 (3)目的基因插入质粒后，不能影响质粒的________。;(4)图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的T－DNA导入植物细胞，并防止植物细胞中___对T－DNA的降解。 (5)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞________。 (6)生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的____基因频率的增长速率。;【解析】　本题重点考查转基因技术的相关知识，需特别注意基因工程的步骤、DNA的复制、基因工程的操作工具等知识。本题需特别注意图示过程，从中获取有效信息，然后结合课本知识即可正确解答。 【答案】　(1)4　(2)2　1　(3)复制　(4)DNA水解酶 (5)表面无相应的特异性受体　(6)抗性;B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达;2．(2007年高考北京卷)利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列选项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是(　　) A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因 B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA C．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列 D．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白;3．(2011年上海高考题)科学家已能运用基因工程技术，让羊合成并分泌人的抗体。相关叙述正确的是（ ） ①该技术将导致定向变异 ②DNA连接酶把目的基因与运载体粘性末端的碱基对连接起来 ③蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供资料 ④受精卵是理想的受体 ⑤该羊的产生要用到核移植技术 ⑥该羊的产生要用到胚胎移植技术 A．①②③④ B．③④⑥ C．②③④⑤ D．①③④⑥;4.(2012年广东高考题)科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶蛋白。以下有关该基因工程的叙述错误的是( ) A．采用反转录的方法得到的目的基因有内含子 B．基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的 C．马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞 D．用同一种限制酶处理质粒和含有目的基因的 DNA，可产生黏性末端而形成重组DNA分子;5．(2009