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高温胁迫下甜菜碱对psii修复循环保护机理研究-植物学专业论文
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保密论文在解密后应遵守此规定。
论文作者签名:
导 师 签 名:
日 期:
符号说明
Aldolase: Fructose-bisphosphate aldolase, 果糖-1, 6-二磷酸醛缩酶 APX: Ascorbate peroxidase, 抗坏血酸过氧化物酶
BADH: Betaine aldehyde dehydrogenase, 甜菜碱醛脱氢酶
CAT: Catalase, 过氧化氢酶
COD: Choline oxidase, 胆碱氧化酶
EDTA: Disodium ethylenediaminetetracetate, 乙二胺四乙酸
Fv/Fm: Maximum photochemical efficiency of PSII, PSII 最大光化学效率
GB: Glycinebetaine, 甘氨酸甜菜碱
GAPDH: NADP-glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, 3-磷酸甘油醛脱氢酶 RuBP: Ribulose-1,5-bisphosphate, 核酮糖-1, 5-二磷酸
sFBPase: Stromal fructose-1, 6-bisphosphatase, 基质果糖-1, 6-二磷酸酯酶 ΦPSII:Actual photochemical efficiency of PSII, PSII 实际光化学效率
WT: Wild type, 野生型
PSI: Photosystem I, 光系统 I PSII: Photosystem II, 光系统 II
Pn: Net photosynthetic rate, 净光合速率 PVDF: Polyvinylidene fluoride, 聚偏二氟乙稀 POD: Peroxidase, 过氧化物酶
ROS: Reactive oxygen species, 活性氧
目录
中文摘要1
Abstract 3
1 前言 5
1.1 高温胁迫对植物的影响 5
1.1.1 高温对植物光合作用的影响6
1.1.2 高温对植物 ROS 产生和清除的影响 6
1.1.3 高温对蛋白修复循环的影响7
1.2 甜菜碱概述 7
1.2.1 甜菜碱合成途径8
1.2.2 甜菜碱基因工程研究 10
1.2.3 甜菜碱的运输10
1.2.4 甜菜碱对光合机构的保护作用 11
1.3 PSII 的修复循环 13
PSII 结构和功能 13
PSII 的光抑制 14
1.3.3 PSII 修复循环的蛋白酶 15
1.4 本研究的目的和意义 16
2 材料与方法 17
2.1 实验材料与处理17
2.1.1 实验材料 17
2.1.2 实验材料培养和处理 17
2.1.3 主要仪器、酶与实验试剂17
2.1.4 PCR 所用引物 18
2.2 实验方法 19
2.2.1 CTAB 法提取植物基因组 DNA 19
2.2.2 目的基因的 PCR 扩增 20
2.3 生理指标测定21
2.3.1 甜菜碱含量测定 21
2.3.2 光合速率测定21
2.3.3 叶绿素荧光测定 21
2.3.4 ROS 生成测定 22
2.3.5 抗氧化酶活性的测定 22
2.3.6 卡尔文循环关键酶活性测定 22
2.4 分子生物学实验22
2.4.1 Trizol 法提取植物总 RNA 22
2.4.2 反转录获得 cDNA 的第一条链 23
2.4.3 实时荧光定量 PCR 24
2.4.4 类囊体膜的提取 24
2.4.5 可溶性蛋白的提取 25
2.4.6 聚丙烯酰氨凝胶电泳 25
2.4.7 半干法蛋白转移 26
2.4.8 免疫检测 26
2.4.9 ECL 化学发光法显色 27
2.5 统计分析 27
3 结果与分析 28
3.1 转基因植株的鉴定 28
3.2 转基因植株叶片内甜菜碱含量 28
3.3 甜菜碱对番茄植株净光合速率影响30
3.4 甜菜碱对番茄植株叶绿素荧光变化的影响 30
3.5 甜菜碱对番茄植株体内
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