土壤修复菌M—1固体发酵配方的研究.docVIP

土壤修复菌M—1固体发酵配方的研究 　　摘 要： 固体发酵培养基配方筛选结果表明，腐殖酸（65%）+土（10%）+玉米粉（20%）+豆饼粉（5%）+生石灰（06%）较适合M-1菌株的生长繁殖，菌数达到14.9×108cfu/g，远远超出土壤肥料有效活菌数的行业标准。对该菌株培养条件进行正交试验，结果表明，生石灰量04%、含水量40 ml、发酵时间6 d为菌株的最佳发酵条件，有效活菌数达到136×108cfu/g，是初始有效活菌数的近10倍。 　　关键词：土壤修复；M-1；发酵配方 　　中图分类号：S154.38+1 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2012）12-0069-03 　　Study on Solid Fermentation Formula for Soil Remediation Bacteria M-1 　　Liu XiaoHui， Gao XiaoMei， Chen Shun， Wang HongQi， Huan MingHui 　　（Liaoning Institute of Microbiology， Chaoyang 122000， China） 　　Abstract The screening results showed that the formula of 65% humic acid+10% soil+20% corn powder+5% soybean powder+0.6% lime was better for the growth of M-1 strain， and the bacteria count reached 14×108 cfu/g， which was far beyond the industrial standards of effective viable counts in soil fertilizer. The orthogonal test of culture conditions was done， and the results showed that the optimum fermentation conditions were 0.4% lime， 40 ml water， fermenting for 6 days. Under this condition， the viable bacteria count achieved 136×108 cfu/g， which was nearly 10 times of the initial effective viable bacteria count. 　　Key words Soil remediation； M-1； Fermentation formula 　　土地利用率的提高和高度集约化经营加剧了连作障碍的发生，轻者造成减产减收，重者导致绝收，严重制约了设施农业的可持续发展。 　　针对引起连作障碍的主要构成因子，辽宁省微生物研究院筛选出具有抗病、促生功能和良好制剂生产性能的微生物菌株M-1。本试验对其固体发酵培养基配方进行了优化，筛选出最佳发酵条件，为研制优良生防制剂及其产业化开发奠定了基础。 　　1 材料与方法 　　11 试验材料 　　111 原料 腐殖酸、豆饼粉、玉米面、麦麸、生石灰，均过20目筛子。 　　112 菌种保存培养基 高氏1号培养基：淀粉 200 g、KNO3 10 g、K2HPO4 05 g、MgSO4·7H2O 05 g、NaCl 05 g、FeSO4 001 g、琼脂粉16 g，水1 000 ml，pH 72～74；01 MPa压力下蒸汽灭菌20～30 min。 　　12 试验方法 　　121 固体发酵培养基配方的确定 设6组处理（表1），利用腐殖酸为载体，每组100 g，分别装入500 ml三角瓶中，调节水分，达到手握成松散团状、不出水为准。121℃灭菌1 h后，取出。把备好的整支菌种斜面无菌操作，倒入无菌水18 ml搅匀，制成含孢子109 cfu/ml的菌悬液，将1 ml孢子菌悬液接到灭菌后的固体培养基中，置于29℃下培养5 d，每天摇动1～2次。阴干后过20目筛，梯度稀释后用平板计数法测定有效菌数。 　　122 生石灰添加量对M-1菌株生长的影响 采用筛选的较优培养基配方，设定生石灰添加量为0、02%、04%、06%、08%、10%共5个梯度，通过调整配方中生石灰的含量，改变各处理的pH值，其它条件及操作同上。 　　123 含水量对M-1菌株生长的影响 调整配方中的含水量，设定30 、35、40、45 、50 ml共5个梯度，加生石灰量为02%，其他条件同上。 　　124 培养时间对M-1菌株生长的影响