复方天麻滴丸中吴茱萸川芎水提醇沉工艺的研究.docVIP

复方天麻滴丸中吴茱萸川芎水提醇沉工艺的研究 　　摘 要 目的 研究复方天麻滴丸中吴茱萸、川芎水提醇沉工艺。方法 采用单因素分析法结合L?9(3?4)正交试验设计优选吴茱萸、川芎水提醇沉工艺参数，确定水蒸气提取挥发油和醇沉的最佳工艺。结果 水蒸气提取挥发油工艺为浸泡0．5h，加10倍量的水提取5h；最佳醇沉工艺为醇沉浓度为80％，所用乙醇浓度为95％，药液浓度为1．5g/mL，醇沉时间为12h。结论 该提取工艺简单、稳定、可行。? 　　关键词 复方天麻滴丸 正交试验 水提醇沉法?? 　　 　　复方天麻滴丸为我院名老中医邱德文教授长期临床所得经验方，经临床初步观察确定其功用为平肝息风，通络止痛，对偏头痛，眩晕有显著疗效。该方由天麻、吴茱萸等药物组成，其中吴茱萸碱和吴茱萸次碱为该药的主要有效成分，为提高制剂有效成分含量，降低固形物含量，本实验采用正交设计，对其中的醇沉工艺进行研究，为优选复方天麻滴丸生产工艺提供依据。我们在研究吴茱萸、川芎提取工艺时采用水提挥发油－醇沉－醇提，针对这三个工艺步骤，采用了一个单因素优选、两个正交实验，本文报道吴茱萸、川芎水蒸气提取挥发油和醇沉工艺的实验结果。 　　 　　1 实验材料 　　 　　1．1 仪器? 　　美国Agilent1100高效液相色谱仪；KQ3200DE型医用数控超声波清洗器 (昆山市超声仪器有限公司)；AUY220电子分析天平（日本岛津公司）。 　　1．2 试剂与药材? 　　吴茱萸碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号:110802-200504）吴茱萸次碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号:110801-200505）；吴茱萸、川芎；乙醇（食用酒精）；其余均为分析纯。 　　 　　2 实验方法与结果 　　 　　2．1 单因素优选水蒸气提取挥发油工艺 　　2．1．1 浸泡时间的考察? 　　称取吴茱萸、川芎药材（粗粉）各30克，共4份，分别置于1000ml烧杯中，加入600 ml（10倍量）水浸泡，记录浸泡后药材湿重，结果见图1。 　　2．1．2 提取时间的考察 　　 　　称取吴茱萸、川芎药材（粗粉）各30 g，置于1000 ml圆底烧瓶中，加600 ml（10倍量）水，浸泡30 min，加热回流提取挥发油，每隔1 h记录挥发油体积，结果见图2。 　　 　　2．1．3 结果：单因素工艺考察结果表明：水蒸气提取挥发油最佳工艺为称取药材粗粉，加10倍量水浸泡0．5 h，加热回流提取挥发油5 h。 　　2．2 正交实验优选醇沉工艺 　　2．2．1 正交实验设计〔1〕? 　　水提醇沉能有效降低固形物含量，去除淀粉、鞣质等杂质，其主要影响因素有：需要达到的乙醇浓度、待精制浓缩药液的浓度即初膏浓度、乙醇用量和所用乙醇浓度，以及药液温度、加醇方式、室内温度、醇沉时间等〔2〕 。? 　　为了优选最佳醇沉工艺，以醇沉后的沉淀物为指标，检查沉淀是否完全及沉淀物中有无吴茱萸总碱被共沉，选用L9(34)[BFQ]正交表进行试验，因素水平见表1。 　　2．2．2 正交试验结果?? 　　 　　色谱条件〔3〕 色谱柱：Diamonsil C18（4．6×250 mm，5μm）；流动相：乙腈－水（50∶50）；流速：1 mL/min；检测波长：250 nm；柱温：30 ℃；进样量：10 μL。? 　　对照品溶液的制备：精密称取吴茱萸碱对照品、吴茱萸次碱对照品适量，加甲醇分别制成0．1040 mg/mL吴茱萸碱对照品溶液、0．1150 mg/mL吴茱萸次碱对照品溶液。? 　　供试品溶液的制备：取滤渣粉末（过三号筛）约0．2 g，精密称定，置100 mL容量瓶中，加入乙醇约90 mL，浸泡1 h，超声处理（功率250 W，频率33 kHz）40分钟，放冷，加乙醇至刻度，摇匀，滤过（0．45 μm），取续滤液，即得。? 　　结果：各组实验沉淀物按上述色谱条件进行色谱分析，所得结果显示在吴茱萸碱、吴茱萸次碱对照品相应出峰位置均无峰出现，如图3。? 　　②直观分析与方差分析 　　 　　见表2、表3。经方差分析结果可知，因素A（醇沉浓度）有显著性影响（P＜0．05），因素B、C、D无显著性差异（P＞0．05），影响顺序：A＞C＞D＞B，最佳醇沉工艺为：A?3B?3C?2D?3，即醇沉浓度为80％，所用乙醇浓度为95％，药液浓度为1．5 g/mL，醇沉时间为12 h。 　　 　　 　　2．3 最佳工艺的验证? 　　按正交实验所优选最佳工艺条件进行了3次重复试验， 三组沉淀物中均未检出吴茱萸总碱成分，沉淀物得滤分别为：11．97％、12．32％、11．67％(RSD＝2．72％)。 　　 　　3 讨论 　　 　　3．1 整个实验过程操作务必规范，否