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心肌缺血动物模型制备的方法的研究进展 　　摘要：心血管疾病是人类病死率最高的疾病之一，而缺血性心肌病在其中起主导作用[1-2]。有关心肌缺血动物模型制备方法的研究己取得一定进展，但与临床心肌缺血的病理过程还有一定的差异。在实验动物的选择，制备模型的实验技术，特别是心肌缺血动物模型的标准尚有待进一步统一和制定。借助放射影像学介入技术，在不开胸的前提下，经心导管制备心肌缺血动物模型，因其具有诸多优点，将成为今后研究的一个发展趋势。 　　关键词：心肌缺血；动物模型；模型制备 　　本文实验研究已制备了多种心肌缺血动物模型，如药物注射方法 ，冠状动脉结扎法，这些均是借助物理、化学实验方法使血管急性阻塞，造成心肌急性缺血，药物注射方法都是一过性的，对慢性试验难以适合，冠状动脉结扎法临床相关性好，是一个比较理想的心肌缺血模型，但此模型需要复杂的开胸手术，对动物损伤大。因此，为提高该病的临床疗效，为心肌缺血的临床和实验研究提供一个更加合适的研究平台，急需有待建立一种更加符合临床病理生理过程，适合能多次给药与能长期观察心功能的心肌缺血模型。因此本文对目前心肌缺血模型制备的方法学进行综述，旨在为临床应用提供参考，具体报道如下。 　　1 药物法 　　1.1垂体后叶素（Pit）致动物心肌缺血模型 王怡等采用与实验前1d，以0.35U/Kg的剂量，舌下静脉注射浓度为1U/2mL 垂体后叶素Pit的方法，通过心电图变化，对动物经行Pit敏感性筛查， T波明显抬高，ST段抬高超过0.1mv 的大鼠方可用于实验。合格的大鼠，灌胃给药后，采用腹腔注射3% 戊巴比妥纳（30 mg/kg）麻醉处理，仰位固定，通过多道生理记录仪，对Ⅱ导联心电图经行动态描记，正常者舌下静脉注Pit 0.35 U/kg，于5s内完成，观测3h内生理指标如：①观察动态心电图变化；②心脏取血，检测各项生化指标如CK、SOD、LDH、MDA。结果显示：模型组大鼠注射Pit后，第1期心电图即可发生变化：T波即刻显著抬高，15s时达到最高峰，注射Pit 1min后，第2期心电图发生变化：T波出现低平、双相、倒置，心率变慢，Q-T及P-R间期延长等，生化指标LDH、CK、MDA升高，而SOD下降。 　　1.2异丙肾上腺素（Iso）致动物心肌缺血模型 高光华等选用健康纯系Wistar大鼠，给予腹腔内注射ISO 0.5mg?kg-1?d-1，共2次，检测下列指标：①心动图；②超氧化物歧化酶MDA、SOD；③病理组织学心肌TTC染色； 结果以T波高耸，S-T段抬高，MDA升高，SOD降低，NO降低。张腾等选用4% Iso，给大鼠皮下注射50mg/kg，共2次，检测下列指标：①心动图；②心肌酶CK，LDH；③病理组织学心肌TTC染色； 结果以T波高耸，S-T段抬高，CK，LDH都升高。 　　2 冠状动脉结扎方法 　　2.1借助呼吸机经气管切开插管 高秀梅等选用（200±50）g雄性大鼠，采用3%戊巴比妥钠按照30mg/kg的剂量腹腔注射经行麻醉处理，仰位固定，连接心电图，观察记录标准Ⅱ导联心电图，在无菌条件下，充分显露气管，与第2～3气管环间横行切开，插气管插管，深度约为0.5～1cm。通过呼吸机经行人工控制呼吸，频率控制在90次/min，潮气量10～12ml，呼吸比为1：1，于胸骨第3～4肋问切开皮肤约1cm，将组织逐层分离，于2～3肋骨间开胸，暴露心脏及大血管根部，剪开心包，将心脏挤出，取LAD起始部，用6-0 Prolene线缝针，进针深度控制在0.1cm，宽度为0.1～0.2cm；将心脏回置胸廓内，待经历数十次心动周期后，结扎处理，数分钟后，彻底止血后逐层关胸。恢复大鼠自主呼吸，气管切口及颈部切口开放，不作缝合。手术过程中分别与开胸后、缝针后、结扎后和关胸后四个点观察记录心电图变化；合格动物于第2w与第6w后复查心电图。术后连续5d抗感染治疗。检测下列指标：①动态观察心电图变化；②各项生化指标（LDH、CK、MDA、SOD）；③病理组织学心肌TTC染色。结果显示：大鼠结扎LAD 10min后 ST 段明显抬高（≥0.1mv），大鼠结扎LAD21h 后坏死面积高60.35%，21h后心脏取血以检测得出LDH、CK、MDA升高，SOD下降。 　　2.2借助呼吸机经口鼻气管插管 李贻奎等在结扎LAD时，其他操作同上，只是把上面的气管切开后气管插管接呼吸机改为经口插管，不作气管切开，优点：操作对动物损伤小，术后对动物影响小，降低死亡率。但此法应用报道的比较少，且经口插管时，操作有难度，不易把握。 　　2.3不使用呼吸机直接开胸法 韩燕全在不借助呼吸机的情况下，结扎LAD时，直接于左第4肋间开胸暴露心脏，距LAD起点2～3mm处，穿5个0手术线结扎，闭胸。结扎LAD后心电图显示ST段立