多功能CT荧光纳米分子探针的制备以及其应用-生物医学工程专业论文.docx

万方数据 万方数据 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其它个人或 集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在 文中以明确方式标明。本人完全意识到，本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权 保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。 本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检 索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本论文属于 保 密□，在 年解密后适用本授权书。 不保密□。 (请在以上方框内打“√”) 学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日 华 华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 摘 要 在小动物成像模式中，单一的 X 射线计算机断层扫描(CT)成像与荧光分子成像 分别存在各自的优点与不足。然而，CT 与荧光成像的结合却是一种理想的双模式分 子成像模式，它可实现分子功能成像与组织结构成像的完美统一。与之相对应的 CT/ 荧光双模式探针则是实现这两种成像技术融合的前提条件与关键条件之一。目前， CT/荧光双模式探针主要采用贵金属或者碘与有机染料相结合得到的，但在探针的设 计、制备与生物应用中存在诸多问题。如某些 CT 造影剂对荧光化合物有淬灭效应， CT/荧光双模式探针的粒径大小、表面修饰等因素，对探针在体内的生物相容性均有 影响，CT/荧光双模式探针体内和体外 CT 造影能力或者荧光强度较低等，这些都与 CT 造影剂和荧光化合物有关。与已报道的贵金属 CT 造影剂相比，金属铋(Bi)具有 更高的原子序数和 X 线衰减系数、原料低廉、毒性较低，是一种潜在的 CT 造影剂。 量子点(QDs)则是一种优异的荧光分子探针，表面易被功能化、高荧光产率等优点使 其在双模式探针的生物应用中更具优势。因此，研制具有生物相容性的 CT 增强与荧 光的混合纳米探针，对双模式成像以及生命科学的研究有着重要的临床应用价值。 本研究完成的主要内容如下： (1) 采用“hot injection”方法制备了油溶性硫化铋纳米颗粒，再利用三嵌段共聚物 Pluronic F127(PF127)的两亲性进一步对纳米颗粒进行表面修饰，得到 PF127 修饰的 水溶性硫化铋(Bi2S3-PF127)纳米颗粒。透射电镜结果显示，纳米 Bi2S3-PF127 为棒状 结构，长 14.85±1.70 nm，宽 4.79±0.63 nm，分散性较好。通过长时间考察探针在不 同温度条件下水动力学尺寸、多分散性指数(PDI)以及 Zeta 电位的变化，结果发现 4-37 °C 条件下，温度对纳米 Bi2S3-PF127 影响不大，探针具有较好的稳定性。对小 鼠 Balb/C 尾静脉注射纳米 Bi2S3-PF127 后的 CT 成像结果表明，该探针具有明显的 CT 造影增强效果。同时，我们进一步研究了 Bi2S3-PF127 在小鼠体内的毒性，各主 要器脏的组织病理学检查结果未发现结构改变，肝脏毒性实验没有发现纳米颗粒的 不利影响，血液分析也表明其具有良好的血液安全性。利用电感耦合等离子体原子 I II万方数据 II 万方数据 发射光谱仪(ICP-AES)测定 Bi3+浓度，研究该探针在小鼠体内生物分布，结果表明注 射 48 h 后，探针基本上被清除。此外，探针的血液的半衰期为 5.0 h 也说明其具有长 循环时间。这些实验结果表明 PF127 修饰的水溶性硫化铋具有很好的生物相容性和 安全性。 (2) 采用反相微乳液一锅法制备具有 CT 和荧光造影能力的双模式探针。即在反 相微乳液体系首先合成纳米 Bi2S3，再加入 QD，之后利用 TEOS 水解将纳米 Bi2S3 和 QD 包裹在生成的纳米二氧化硅中，最后用 PEG 硅烷化试剂对颗粒表面进行修饰， 最终得到大小均一、粒径约为 50 nm 的纳米 Bi2S3-QD@SiO2-PEG 探针。体外实验结 果表明，该纳米探针具有明显的 CT 造影增强效果及荧光成像能力，当铋浓度为 15 mg/mL 时，CT 值约为 2000 HU，明显优于纳米碘油造影剂；细胞毒性实验也表明当 Bi 浓度高达 2.70 mg/mL 时，小鼠巨噬细胞 RAW264.7 的生长没有受到明显抑制，存 活率高于 85%。小鼠的体内实验表明，该探针在体内同样有着优良的 CT 造影增强效 果及荧光成像能力，相对医用碘造影剂具有更长的循环时间，可达到