肠易激综合征大鼠模型结肠树突状细胞生物学行为体外研究-临床医学(内科学)专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 南华大学学位论文原创性声明 本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含 其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学 位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文 中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 作者签名： 年 月 日 南华大学学位论文版权使用授权书 本学位论文是本人在南华大学攻读（博/硕）士学位期间在导师指导下完成的 学位论文。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得以其它单 位的名义发表。本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有 权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或 部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或湖 南省有关部门规定送交学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕士学位论 文全文数据库》，并按《中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程》规定享 受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到《中国学位 论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学位论文， 解密后适用该授权。 作者签名： 年 月 日 导师签名： 年 月 日 万方数据 万方数据 目 录 缩略词表 I 中文摘要 III Abstract V 论文正文 第 1 章 前言 1 第 2 章 材料和仪器 5 第 3 章 步骤和方法 7 第 4 章 结果 21 第 5 章 讨论 27 第 6 章 结论 31 参考文献 33 综述 37 在读期间发表文章 47 致谢 49 万方数据 万方数据 万方数据 万方数据 缩略词表 英文缩写 IBS 英文全称 Irritable bowel syndrome 中文全称 肠易激综合征 DC Dendritic cell 树突状细胞 TGF-β1 Transforming Growth factor β1 转化生长因子 β1 AWR Abdominal with-drawal reflex 腹壁撤退反射 shRNA short hairpin RNA 基因启动子发卡样特 异性干扰寡核苷酸序 列 PBS Phosphate Buffer Solution 磷酸盐缓冲液 RUNX3 Runt-related transcription factor 3 Runt 相关转录因子 3 FBS Fetal bovine serum 胎牛血清 HEPES 4-(2-hydroxyerhyl)piperazine-1-erhanesulfo 4-羟乙基哌嗪乙磺酸 nic acid DTT DL-Dithiothreitol 二硫苏糖醇 DNase I Deoxyribonuclease I 脱氧核糖核酸酶 I rrGM-CSF Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor 重组大鼠粒细胞-巨 噬细胞集落刺激因子 rrIL-4 Recombinant Rat Interluekin-4 重组大鼠白介素-4 RPMI-1640 Roswell Park Memorial Institute-1640 RPMI-1640 培养基 MTT 3(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2- 噻唑蓝 H-tetrazolium bromide RUNX3 Runt-related transcription factor-3 人类相关转录因子 3 MHC-II major histocompatibility complex-II 主要组织相容性复合 体-II LP HYPERLINK /ciku/lamina_propria/ lamina propria 固有层 I II 肠易激综合征大鼠模型结肠树突状细胞生物学行 为体外研究 摘要 目的： 探讨 Runx3、TGF-β1 及树突状细胞与肠易激综合征（Irritable bowel syndrome，IBS）发病中的相关性，进而为 IBS 的发病机制提 供线索。 方法： 通过乙酸灌肠加束缚应激方法建立肠易激综合征大鼠模型。从每 只大鼠中提取一小段结肠在电镜观察树突状细胞的形态。然后运用密 度梯度离心法分离出大鼠结肠粘膜固有层的树突状细胞，分离出来的 树突状细胞在体外培养 12 天后再经过免疫磁珠分选器分选。再运用 siRNA 技术转染 RUNX3 基因启动子发卡样特异性干扰寡核苷酸序 列（shRNA-RUNX3）至分离出的树突状细胞。继续培养 7 天。分别 进行流式细胞仪检测 DC 表型、运用