茶籽粕中茶皂素的提取及其分离纯化工艺的研究-食品科学与工程专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 上海海洋大学硕士学位论文 上海海洋大学学位论文原创性声明 本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位 论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除 文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集 体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我 对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 上海海洋大学学位论文版权使用授权书 学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定， 同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子 版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海水产大学可以将本学位 论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、 缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本学位论文属于 保密 ，在 10 年解密后适用本版权书。 不保密 学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日 III 上海海 上海海洋大学硕士学位论文 茶籽粕中茶皂素的提取及其分离纯化工艺的研究 摘 要 我国茶资源丰富，油茶树的种植面积广阔，在采摘油茶果，进行压榨制取茶 油之后，剩余的茶渣就是茶籽粕，茶籽粕含有一定的茶皂素是一种非常好的非离 子表面活性剂。它不但具有很好的起泡性，优异的乳化性，还具有杀灭细菌，病 虫害等功能。因此，茶皂素可以广泛应用于生活日用品、工农业产品当中。 目前，国内及国外提取茶皂素的方法有很多种。其中有机溶剂法是目前使用 较广泛的提取方法，用有机溶剂进行提取，主要的优点是操作方便，可以使用现 有的成熟技术大规模商业化生产。但茶籽粕中含有脂肪、蛋白、糖类、纤维素等 多种成分，用有机溶剂提取不能很好去除，加上有机溶剂的成本高和对环境污染 作用。因此，经参阅相关文献，本实验采用生物酶法，探讨了脂肪酶、纤维素酶、 蛋白酶对茶皂素提取效果的影响，旨在探索这种方法的可行性和最佳提取工艺条 件。在水酶法提取的基础之上，随后开展茶皂素的进一步纯化研究。由于油茶皂 苷的结构比较复杂，成分众多，形式多样，以及茶皂素粗品和杂质极性相近，难 以去除及分离，使得油茶皂苷的单体分离和纯化都比较困难。本实验采用水酶法 制得茶皂素粗提液，并用氧化钙对粗提液进行浓缩，经 S-8 大孔树脂纯化得到茶 皂素。试验中，我们对大孔树脂纯化茶皂素以及传统氧化钙综合法提取茶皂素进 行了比较，发现将这两种方法结合能够很好的提高茶皂素的得率和纯度。经过对 茶皂素的粗提，纯化的研究，实验得到了一定纯度的茶皂素。为了精确的测量和 分析，采用高效液相色谱法对茶皂素的含量进行探索，建立了高效液相色谱定量 分析茶皂素的方法。在确定了茶皂素的含量之后，实验中对纯度比较高的组分进 行红外光谱和质谱鉴定。经分析表明，实验所分离的茶皂素为山茶皂苷 B1、B2、 A4。最后，实验对茶皂素的起泡性能和去污性能进行了分析，研究表明茶皂素具 有丰富的起泡性和较温和的去污能力，可以将茶皂素应用于日用去污洗涤产品 中。本研究主要得到以下几个结论： 1. 用生物酶法提取茶皂素的工艺，以水为浸提液，以茶皂素得率为评价指 标，综合脂肪酶、纤维素酶、蛋白酶，经单因素分析选择料液比为 1/20（ M/V）、 酶解时间为 60 min，振荡速率为 150 r/min，在单因素的基础上重点考察了与茶 皂素得率有重要影响的温度、脂肪酶量、纤维素酶量和蛋白酶量等因素。经响应 面试验结果表明，茶皂素提取的较优工艺条件为提取温度 50℃、时间 1 h、脂肪 酶量 0.31%、纤维素酶量 0.32%、蛋白酶量 0.36%，此时茶皂素得率为 86.86%± 4 0.92%，经 S-8 大孔树脂纯化回收茶皂素，其纯度为 87.04%。 2. 用大孔树脂对粗茶皂素进行分离纯化，确定其分离纯化的最优条件。主 要通过考察不同极性的大孔树脂 D-101、 AB-8、 S-8、 X-5、 HPD-100 的性 能，从中筛选出具有代表性的 S-8 大孔树脂，对其吸附性和解析能力进行综合 分析。确定了其饱和吸附量为 1.12mg/ml，上样液的最佳流速为 3.03ml/min。以 茶皂素得率为指标，结合响应面分析法确定了乙醇作为洗脱剂的洗脱条件，其洗 脱最佳浓度为 91.20%，流速为 7.26ml/min，乙醇用量为 101.31ml，茶皂素得率 为 86.30%。根据分析结果，对含量为 47.38%的茶皂素进行分离纯化，最终茶 皂素得率为 81.74%，回收率为 78.29%，纯度为 85.36%。 3. 用氧化钙与 S-8 大孔树脂纯化茶皂素工艺。以水酶法浸提液为原料，以茶 皂素得率和纯度为评价指标，综合分析了不同沉淀剂对茶皂素水酶提取液的去杂 效果，经单因