5.5 定性定量方法.pptVIP

* 第五章色谱分析法 5.5.1 色谱定性鉴定方法 5.5.2 色谱定量分析方法 第五节 色谱定性定量分析方法 * 5.5.1 色谱定性鉴定方法 但不同物质在同一色谱条件下，可能具有相似或相同保留值，即保留值并非专属的。因此仅根据保留值对一个完全未知的样品定性是困难的。且不适用于不同仪器上获得的数据之间的对比。 如果在了解样品的来源、性质、分析要求的基础上，对样品组成作初步的判断，再结合下列的方法可进行相关定性分析。 1.利用纯物质定性的方法 （1）利用保留值定性：色谱定性分析就是要确定各色谱峰所代表的化合物。物质在一定色谱条件下均有确定的保留值，因此保留值可作为一种定性指标。各种色谱定性方法都是基于保留值的。 * （2）利用加入法定性： 当未知样品中组分较多，所得色谱峰过密，用上述方法不易辨认时，或仅作未知样品指定项目分析时均可用此法。 首先作出未知样品的色谱图，然后在未知样品加入某已知物，又得到一个色谱图。峰高增加的组分即可能为这种已知物。 2.利用文献保留值定性 相对保留值r21：相对保留值r21仅与柱温和固定液性质有关。在色谱手册中都列有各种物质在不同固定液上的保留数据，可以用来进行定性鉴定。 * 3.保留指数定性法 retention index 又称Kovats指数（Ⅰ），是一种重现性较好的定性参数。测定方法： 将正构烷烃作为标准，规定其保留指数为分子中碳原子个数乘以100（如正己烷的保留指数为600）。 其它物质的保留指数（IX）是通过选定两个相邻的正构烷烃，其分别具有Z和Z＋1个碳原子。被测物质X的调整保留时间应在相邻两个正构烷烃的调整保留值之间如图： * 保留指数可用内插法计算 只要柱温与固定相相同，就可应用文献值进行鉴定，而不必用纯物质相对照。与其它实验条件无关，准确度和重现性都很好 * 3.与其他分析仪器联用的定性方法（最可靠） 小型化的台式色质谱联用仪（GC-MS；LC-MS） 色谱-红外光谱仪联用仪； 组分的结构鉴定 Sample Sample 5890 1.0 DEG/MIN HEWLETT PACKARD HEWLETT PACKARD 5972A Mass Selective Detector D C B A A B C D Gas Chromatograph (GC) Mass Spectrometer (MS) Separation Identification B A C D * 5.5.2 色谱定量分析方法 m i = fi ·Ai 定量分析的任务是求出混合样品中各组分的百分含量。 色谱定量的依据是，当操作条件一致时，被测组分的质量（或浓度）与检测器给出的响应信号成正比。 m i为被测组分i的质量；Ai 为被测组分i的峰面积； fi为被测组分i的校正因子。 可见，进行色谱定量分析时需要： （1）准确测量检测器的响应信号— 峰面积或峰高； （2）准确求得比例常数— 校正因子； （3）正确选择合适的定量计算方法。将测得的峰面积或峰高换算为组分的百分含量。 * 5.5.2 色谱定量分析方法 1. 峰面积的测量 （1）峰高（h）乘半峰宽（Y 1/2）法：近似将色谱峰当作等腰三角形。此法算出的面积是实际峰面积的0.94倍： A = 1.064 h·Y1/2 （2）峰高乘平均峰宽法：当峰形不对称时，可在峰高0.15和0.85处分别测定峰宽，由下式计算峰面积： A = h·（Y 0.15 + Y 0.85 ）/ 2 （3）峰高乘保留时间法：在一定操作条件下，同系物的半峰宽与保留时间成正比，对于难于测量半峰宽的窄峰、重叠峰（未完全重叠），可用此法测定峰面积： A = h·b·tR （4）自动积分和微机处理法 峰面积是色谱图提供的基本定量数据；其测量的准确与否直接影响定量结果。不同峰形的色谱峰采用不同的定量方法： * 2. 定量校正因子 * * 试样中各组分质量与其色谱峰面积成正比，即： m i = fi ·Ai 绝对校正因子：比例系数f i ，单位面积对应的物质量： f i =m i / Ai 定量校正因子与检测器响应值成倒数关系： f i = 1 / Si 校正因子： 但要精确求出fi值是比较困难的。一方面由于精确测量绝对进样量困难；另一方面峰面积与色谱条件有关，要保持测定fi值时的色谱条件相