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桔梗多糖提取纯化工艺的研究进展 　　摘要：在查阅、收集国内桔梗多糖提取、分离纯化工艺文献基础上，综述近几年桔梗多糖的提取、分离纯化工艺研究进展，旨在为进一步开展桔梗相关研究提供参考。 　　关键词：桔梗；多糖；提取；纯化 　　中图分类号：R932 文献标识码：A 文章编号：1674-1161（2016）09-0032-02 　　桔梗为桔梗科植物桔梗（Platycodon grandiflorum A. DC）的干燥根，具有降血脂、降血糖、抗炎、止咳化痰、抗肿瘤、抗氧化等功效。桔梗是药食同源的佳品，全国各地均有栽培。研究表明，桔梗多糖是桔梗中重要的生物活性物质之一，具有较好的抗肿瘤及增强机体免疫活性等作用，广泛应用于医药、保健食品。国内对桔梗多糖的提取纯化进行了大量研究，在查阅收集大量文献的基础上，综述近几年桔梗多糖的提取、分离纯化等研究进展，旨在为进一步进行相关研究提供参考。 　　1 提取方法 　　1.1 水浸提法 　　水浸提桔梗多糖是传统方法之一，成本低、不破坏生物活性、方便实用且安全性高，但耗时、提取率低。张晶等分析不同提取温度对桔梗多糖提取率及抗氧化性的影响，结果表明：50 ℃时桔梗多糖的提取率最高，为35.82%；提取率大小依次为50 ℃?40 ℃?60 ℃?30 ℃?20 ℃，与40 ℃的提取率相比差异不显著，与60 ℃的提取率相比差异显著，与20 ℃、30 ℃的提取率相比差异极显著。 　　韩美艳采用传统的水煮醇沉法提取桔梗多糖，分别考察提取温度、提取时间、料液比、提取次数对桔梗多糖提取率的影响，在单因素试验的基础上采用4因素3水平正交试验优化到的桔梗多糖提取工艺为：提取温度80 ℃，提取时间为2 h，提取次数为2次，料液比为1?E25。通过3次平行验证试验得出该方案下桔梗多糖的提取率为42.51%。 　　1.2 超声辅助提取法 　　超声波辅助提取是在水浸提的同时加超声波辅助。此法不仅缩短提取时间，提高提取率，同时避免高温对有效成分的影?。于侃超等采用单因素和正交试验，比较热水浸提法、超声波提取法和微波提取法提取桔梗多糖的最优条件，为其深入开发利用提供依据，结果表明，超声波提取法、微波提取法和水提取法的提取率分别为34.16%，31.30%和25.57%；超声波提取法和微波提取法优于传统的水提取方法，其中超声波提取法提取率最高，为34.16%；微波提取法提取时间最短，为4 min。 　　1.4 微波辅助提取法 　　微波辅助是在水浸提的同时加入微波，此法具有高效、快速、节能的优点。刘畅以桔梗多糖为研究对象，采用单因素分组试验法对桔梗多糖提取工艺（热水法、微波辅助提取法及超声辅助提取法）进行初步研究，比较料液比、温度、提取时间、微波功率、粒度等因素对多糖提取率的影响。结果表明，微波辅助提取时间最短且多糖提取率最高的最佳工艺条件为：微波功率250 W，微波时间4 min，粒度60目，料液比1?E40。 　　1.5 其它提取方法 　　除上述提取方法外，很多研究也尝试采用超声波辅助热水浸提法和微波协同酶解提取法、超临界二氧化碳提取法等提取桔梗多糖，均取得了较好的提取率。 　　刘畅采用单因素及正交实验对微波辅助热水浸提桔梗多糖工艺进行了研究，分析了料液比、温度、提取时间、微波功率、粒度、微波时间等因素对多糖提取率的影响。实验结果表明传统热水提取法的最佳工艺条件：浸提温度80℃，提取时间240 min，粒度80目，料液比1：20；微波辅助热水浸提桔梗多糖的最佳工艺条件：料液比1?E20，微波处理时间2 min，微波功率400 W，热水浸提温度80℃，粒度80目，热水浸提时间240 min。采取短时高频微波前处理利于多糖析出，再通过后续热水浸提，其多糖提取率为32.85%，高于传统热水浸提（16.59%）和微波提取（22.83%）。 　　迟宗磊等采用微波协同酶解法提取桔梗多糖，实验步骤：选择晒干的桔梗，粉碎后过40-80目筛，得桔梗粉，在桔梗粉中加水并搅拌均匀，桔梗粉与水的重量比例为1?E5-10，在水中浸泡8～16 h，加入纤维素酶酶解，再加入无花果蛋白酶和菠萝蛋白酶，在微波条件下酶解，酶解后浓缩并脱色，离心，取上清液浓缩醇沉，再离心，采用乙醇清 洗沉淀，冷冻干燥后并粉碎，得桔梗多糖。 　　2 分离纯化方法 　　要想得到较纯的多糖，则需要除去粗多糖中非多糖组分。通过有机溶剂沉淀得到的多糖带有一些色素、蛋白质等杂质，所以粗多糖需进行脱色和脱蛋白处理。常用的脱蛋白的方法有Sevag法、盐酸法、三氟三氯乙烷、酶解等；常用的脱色的方法有双氧水脱色、树脂脱色、活性炭脱色、聚酰氨脱色等；纯化多糖的方法有分级沉淀法、季铵盐沉淀法、离子交换层析法、凝胶柱层析法等，但较为常用的是离子交换层析法和凝胶层析法。