基因的重组与转移幻灯片.pptVIP

* 把重组的噬菌体? DNA或Cosmid质粒DNA包装成具有感染能力的?噬菌体颗粒。 6. 体外包装的噬菌体的转导 （1）体外包装（in vitro packaging） （2）转导（transduction） 通过受体菌细胞表面的? DNA接受器位点（receptor site)，使带有外源基因的重组体DNA注入受体大肠杆菌进行扩增。 * cI857基因是个温度敏感性阻遏蛋白基因，感染细菌后，在32℃下培养细菌时能够保持溶源性。 （3）cI857基因突变的?噬菌体 但当温度升高到44℃—45℃时，就会导致cI基因编码的阻遏蛋白失活，?DNA复制、外壳蛋白合成。便于提取外壳蛋白。 但由于该噬菌体的S基因上有一个突变，所以细菌还不裂解。 * cI857 其它基因 溶源状态（?DNA不转录、不翻译） ?DNA 阻遏 蛋白 阻遏 蛋白 44℃—45℃ ?DNA转录、翻译合成外壳蛋白 32℃ * ?噬菌体1 外壳蛋白基因E发生了无义突变，不能合成头部蛋白，但能合成其它外壳蛋白（尾部蛋白）。 在cI857基因突变的?噬菌体的基础上，选择两种外壳蛋白的突变型?噬菌体。 （4） 互补型噬菌体 外壳蛋白基因D发生了无义突变，不能合成头部的包装识别蛋白，但能合成其它外壳蛋白（头部、尾部蛋白）。 ?噬菌体2 * (5) 体外包装过程 * 体外包装好的重组噬菌体感染受体