二维电泳和质谱技术鉴定食管鳞癌N-连接糖蛋白差异表达谱医学病理学与病理生理学专业论文.docxVIP

关于学位论文独创声明和学术诚信承诺 本人向河南大学提出硕士学位申请。本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导 师的指导下独立完成的，对所研究的课题有新的见解。据我所知，除文中特别加以说明、 标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括其 他人为获得任何教育、科研机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对 本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 在此本人郑重承诺：所呈交的学位论文不存在舞弊作伪行为，文责自负。 学位申请人（学位论文作者）签名： 201 年 月 日 关于学位论文著作权使用授权书 本人经河南大学审核批准授予硕士学位。作为学位论文的作者，本人完全了解并同 意河南大学有关保留、使用学位论文的要求，即河南大学有权向国家图书馆、科研信息 机构、数据收集机构和本校图书馆等提供学位论文（纸质文本和电子文本）以供公众检 索、查阅。本人授权河南大学出于宣扬、展览学校学术发展和进行学术交流等目的，可 以采取影印、缩印、扫描和拷贝等复制手段保存、汇编学位论文（纸质文本和电子文本）。 （涉及保密内容的学位论文在解密后适用本授权书） 学位获得者（学位论文作者）签名： 201 年 月 日 学位论文指导教师签名： 201 年 月 日 摘 要 背 景 EC（Esophageal Cancer, EC）是世界上八大常见的恶性肿瘤之一。在中国，EC的主 要组织学类型为食管鳞状细胞癌（Esophageal squamous cell carcinoma, ESCC），约占所 有EC的90%。河南太行山区的林州市及其毗邻的辉县、安阳等地区是世界及我国EC发 病率和死亡率最高的地区之一，目前仍是该地区肿瘤相关死亡的主要原因之一。EC的重 要特征之一是高死亡率，大多数病人在临床上确诊之后的生存时间不超过一年，其五年 生存率仅为8%。提高EC治疗效果的关键在于早期发现、早期诊断和早期治疗，食管原 位癌和粘膜内癌患者的术后五年生存率可分别达到100%和95%。然而，目前尚无早期诊 断和预警的有效措施。因此，阐明ESCC的发病因素及多阶段演进分子机制，筛选和鉴 定与癌变密切相关的预警分子，找寻新的治疗靶点和更有效治疗方法，对建立高危人群 监测和ESCC早期诊断的生物标志物和方法，从而降低其发病率和死亡率，具有十分重 要的理论意义和临床应用价值。 定量蛋白质组学是后基因组时代研究热点之一，是疾病诊断的分子标志物筛选和治 疗靶点鉴定的重要工具。二维电泳和稳定同位素标记蛋白或肽段是定量蛋白质组学常用 的两种技术。然而，由于蛋白质组分极其复杂，不但包括同一基因的不同转录体、转录 后不同的剪切体，还涉及翻译后的修饰过程。到目前为止，没有任何单一技术能够彻底 全面的分析任意物种的全部蛋白质组组分，而且高丰度蛋白通常掩盖了具有重要生理、 病理功能的低丰度蛋白。亚蛋白质组学能够有效降低蛋白质组的复杂性，是挖掘低丰度 蛋白生物标志物常用策略之一，如细胞膜、线粒体、细胞核等亚蛋白质组、各功能复合 体蛋白质组、特异物理化学结构的蛋白质组等。 哺乳动物中，蛋白质糖基化修饰是最为常见的一种翻译后修饰，糖蛋白约占所有蛋 白的50%。糖蛋白的寡糖侧链不但具有重要的生理功能，如蛋白质分子细胞内定位、蛋 白稳定性、酶活性、粘附性、蛋白质分子间及细胞间相互作用、识别等功能；而且亦参 与许多病理过程，如蛋白质的异常糖基化是肿瘤形成与进展过程中的一个基本特性，与 癌细胞的侵袭、转移过程密切相关。糖蛋白的功能日益显著和重要，详尽阐明糖蛋白质 组组分及功能有助于增进理解认识生理、病理过程。 根据寡糖侧链共价结合的氨基酸残基不同，可将糖蛋白分为Ｎ-连接糖蛋白（与天 冬酰胺残基酰胺氮相连）和Ｏ-连接糖蛋白（与丝氨酸、苏氨酸或羟赖氨酸残基的羟基 共价结合）。Ｎ-糖基化位点是N-X-S/T组成的三联序列子区域，其中的X可为脯氨酸以 外的任意氨基酸。Ｎ-寡聚糖侧链的变异发生于多种肿瘤，包括寡聚糖核心结构及末端 残基结构的变化；该变异同时也导致同一蛋白形成不同糖蛋白异构体，在二维凝胶电泳 图谱上表现为多个不同等电点或分子量相近的蛋白质点。寡聚糖作为蛋白质分子翻译后 修饰的主要成分之一，大大增加了蛋白质分子的功能多样性。在细胞外的微环境中，Ｎ -连接糖蛋白存在相当普遍，如胞膜蛋白的胞外区域、分泌蛋白及血清、唾液、脑脊液 等体液内。上述证据表明糖蛋白变化反映了许多疾病的病理过程，具有重要的临床应用 价值，故而许多现在临床应用的诊断标志物或治疗靶点多为糖蛋白，如CA125（卵巢癌）、 PSA（前列腺癌）、c-erbB-2(乳腺癌)、AFP-L3和GP73（肝癌）等。可以预见，系统、 定量分析糖蛋白的变化，不但有利于新的疾病诊断标志物、治疗靶点及治疗效