消癌平注射液抗血管生成作用及其机制研究Effectsand-药学学报.PDF

药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 20 16, 51 (2): 309 315 ·309 · 消癌平注射液抗血管生成作用及其机制研究 1 2 2 3 3 2 2* 2* 王美鑑 , 杜丹玉 , 范 薇 , 张 苍 , 刘 阳 , 樊佳红 , 袁胜涛 , 林森森 (1. 江西省肿瘤医院, 江西 南昌 330029; 2. 中国 科大学江苏省新药筛选中心, 江苏 南京 2 10009; 3. 南京圣和药业有限公司, 江苏 南京 210038) 摘要: 研究消癌平注射液对血管生成的影响, 并探索其作用机制与血管内皮生长因子 (VEGF) 信号通路的 相关性。采用CCK8 实验和BrdU 掺入细胞免疫荧光实验检测消癌平注射液对人脐静脉内皮细胞 (HUVECs) 的 增殖影响; 采用细胞划痕愈合和小室迁移实验考 消癌平注射液对HUVECs 的迁移能力影响; 采用HUVECs 管 腔形成实验、大鼠动脉环出芽实验以及鸡胚尿囊膜 (CAM) 实验等考 消癌平注射液的抗血管生成作用; 分别采 用 ELISA 酶联免疫吸附实验和 Western blot 检测 HUVECs 中VEGF 的分泌情况以及血管内皮生长因子受体 2 (VEGFR2) 等蛋白的表达变化。结果显示, 消癌平注射液可剂量和时间依赖性地抑制 HUVECs 增殖, 在 24 、48 和72 h 各时间点对HUVECs 的IC50 值 (mg ·mL 1) 分别为48.7 ±7.14, 29.1 ±2.25 和22.0 ±4.53 。消癌平注射液可 抑制HUVECs 的DNA 合成以及迁移作用; 还可抑制HUVECs 管腔样结构形成, 并且一定浓度下可抑制大鼠动 脉环切口处微血管样结构萌发以及鸡胚尿囊膜血管生长; 此外, 消癌平注射液还可抑制 HUVECs 中VEGF 分泌 并下调p-VEGFR2 和磷酸化蛋白激酶B (p-AKT) 蛋白表达。本研究结果表明, 消癌平注射液可在体外和离体水 平抑制血管生成, 其作用机制可能与抑制VEGF 分泌、VEGF 引起的VEGFR2 及其下游AKT 信号通路活化有关。 关键词: 消癌平注射液; 肿瘤; 血管生成; 血管内皮生长因子; 蛋白激酶B 中图分类号: R966 文献标识码: A 文章编号: 0513-4870 (20 16) 02-0309-07 Effects and mechanisms of Xiao-Ai-Ping injection on angiogenesis 1 2 2 3 3 2 WANG Mei-ji an , DU Dan-yu , FAN Wei