碱基置换移码突变染色体畸变.PPT

碱基置换移码突变染色体畸变

有性杂交:一般指不同遗传型的两性细胞间发生的接合和随之进行的染色体重组,进而产生新遗传型后代的一种育种技术。 用于产有性孢子的微生物。 准性杂交:是一种在同种而不同菌株的体细胞间发生的融合,而可不借减数分裂而导致低频率基因重组并产生重组子的生殖方式。 包括菌丝联结、形成异核体、核融合、体细胞交换和单倍体化。 1、有性杂交——酿酒酵母 将甲 、乙两个双倍体亲本,分别接种到产孢培养基(醋酸钠培养基等)斜面上,使其产生子囊,减数分裂,形成4个单倍体子囊孢子。用蒸馏水洗下子囊,经机械法(加硅藻土和石蜡油,在匀浆管中研磨)或酶法(如蜗牛酶)破环子囊,离心,获得子囊孢子,涂布平板,培养,得到单倍体菌落。把两个亲体的不同性别的单倍体细胞密集接触在一起,有机会出现双倍体的杂交后代。 双倍体细胞和单倍体细胞有很大不同,易于识别。 (1)菌丝联结(anastomosis) (2)形成异核体(heterocaryon) (3)核融合(nuclear fusion)或核配(caryogamy) (4)体细胞交换(somatic crossing-over)和单倍体化 2、准性生殖过程 核配:异核体中的双核偶尔可以发生核融合,产生双倍体杂合子核。 菌丝联结:形态没有区别, 遗传性上有差别的两个同种亲本的单倍体体细胞间发生菌丝联结。 形成异核体:联结后,原有的两个单倍体核集中到同一个细胞中,形成双相异核体。异核体能独立生活。 体细胞交换和单倍体化:体细胞交换即体细胞中染色体的交换,也称有丝分裂交换。双倍体杂合子性状极不稳定,在其进行有丝分裂过程中,其中极少数核中的染色体会发生交换和单倍体化,从而形成了极个别具有新性状的单倍体杂合子。 准性杂交育种(breeding by parasexuality) ① 选择亲本:选择来自不同菌株的合适的营养缺陷型作为准性杂交的亲本。 ② 强制异合:用人为的方法强制两菌株形成异核体。 ③ 移单菌落:将培养皿上长出的这种单菌落移种到基本培养基[-]的斜面上。 ④ 验稳定性:就是检验新菌株究竟是不稳定的异核体,还是稳定的杂合二倍体。 ⑤ 促进变异 在上述工作的基础上,再经过一系列生产性状的测定,就有可能筛选到比较理想的准性杂交种。 3、原生质体融合 通过人为的方法,使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合,借以获得兼有双亲遗传性状的稳定重组子的过程 第四节 基因工程 基因工程(gene engineering,gene technology)又称遗传工程,指人们利用分子生物学的理论和技术,自觉设计、操纵、改变和重建细胞的遗传核心—基因组,从而使生物体的遗传性状发生定向变异,以最大限度地满足人类活动的需要。 一、 定义 特点:可设计性、稳定性、远缘性、风险性 基因工程的基本操作 目的基因的获得 选择合适载体 体外重组 外源基因导入受体细胞(微生物、动物、植物) 筛选和鉴定 应用 (1)从适当的供体细胞(动、植物、微生物的DNA中分离) (2)通过反(逆)转录酶的作用,由mRNA合成cDNA (3)化学合成特定的功能的目的基因 1.目的基因获得 2.合适载体选择 (1)分子量较小,是一个有自我复制能力的复制子 (2)能在受体细胞内大量增殖(有较高的复制率) (3)载体上最好只有一个限制性内切酶的切口,使目的基因能固定地整合到载体DNA的一定位置 (4)载体上必须有一种选择性遗传标记,以便及时把极少数“工程菌”或“工程细胞”选择出来 3.目的基因与载体DNA的体外重组 4.重组载体引入受体细胞 5.重组受体细胞的筛选和鉴定 6.“工程菌”或“工程细胞的大规模培养 基因工程的应用 在生产多肽类药物、疫苗的应用 改造传统工业发酵菌种 动、植物特性的基因工程改良 基因工程在环境保护中的应用 这部分自学——如下方面: 第五节 菌种的衰退、复壮和保藏 性状稳定的菌种是微生物学工作最基本、最重要的基本要求,否则生产或科研都无法正常进行 影响微生物菌种稳定性的因素: a)变异;b)污染; c)死亡 一. 菌种的衰退与复壮 衰退(degeneration):指由于自发突变的结果,而使某物种原有的一系列生物学性状发生量变或质变的现象 具体表现:原有形态性状变化、生长速度变慢、代谢产物生产能力下降、致病菌对宿主侵染力下降、对外界环境抵抗力下降等 原因:1.基因突变—控制生产形状的有关基因负突变,造成菌种衰退; 2.培养条件或菌种保藏方法。 规律:从量变到质变的过程。群体—衰退个体越来越多,越来越严重;形状—开始局部(先个别形状),随后为整体;产

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