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pcr技术简介及检验
PCR技术的简介
孙涛
PCR技术简史
PCR的基本原理
PCR检验
发展史
PCR技术简史 PCR仪变迁
Kary Mullis
发展史
PCR技术简史 PCR仪变迁
1985年10月25 日,申请了PCR的专利,
1987年7月28 日批准(专利号4683202 ),
这次MULLIS是第一发明人;
1986年6月,CETUS公司纯化了第一种
高温菌DNA聚合酶,Taq DNA 聚合酶;
1988年,第一台PCR仪问世。
Kary B. Mullis
The Unusual Origin
of the Polymerase Chain Reaction
1989年美国 《Science》杂志列PCR 为十余项重大
科学发明之首,比喻1989年为PCR爆炸年,Mullis荣
获1993年度诺贝尔化学奖。
发展史
PCR仪的变迁 PCR仪变迁
手动/机械手式水浴基因扩增
自动化控制型定性基因扩增仪
终点定量/半定量扩增仪
实时定量扩增仪
手动/机械手式水浴基因扩增
94℃ 30s 55℃ 45s 72℃ 60s
PCR循环
实时荧光定量PCR仪
扩增时间为2小时
一次扩增数量96人
份
PCR反应条件
PCR的基本原理 PCR过程
PCR的特点
标准的PCR反应体系
引物
酶
4种dNTP混合物
模板DNA
Mg2+
PCR反应条件
PCR的基本原理 PCR过程
PCR的特点
1 2 3
高温变性 低温退火 适温延伸 重复1~3步
94 25~30轮
温
形
D
度 72
N
成 目的DNA片
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