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pcr技术简介及检验

PCR技术的简介 孙涛 PCR技术简史 PCR的基本原理 PCR检验 发展史 PCR技术简史 PCR仪变迁 Kary Mullis 发展史 PCR技术简史 PCR仪变迁 1985年10月25 日,申请了PCR的专利, 1987年7月28 日批准(专利号4683202 ), 这次MULLIS是第一发明人; 1986年6月,CETUS公司纯化了第一种 高温菌DNA聚合酶,Taq DNA 聚合酶; 1988年,第一台PCR仪问世。 Kary B. Mullis The Unusual Origin of the Polymerase Chain Reaction 1989年美国 《Science》杂志列PCR 为十余项重大 科学发明之首,比喻1989年为PCR爆炸年,Mullis荣 获1993年度诺贝尔化学奖。 发展史 PCR仪的变迁 PCR仪变迁 手动/机械手式水浴基因扩增 自动化控制型定性基因扩增仪 终点定量/半定量扩增仪 实时定量扩增仪 手动/机械手式水浴基因扩增 94℃ 30s 55℃ 45s 72℃ 60s PCR循环 实时荧光定量PCR仪 扩增时间为2小时 一次扩增数量96人 份 PCR反应条件 PCR的基本原理 PCR过程 PCR的特点 标准的PCR反应体系 引物 酶 4种dNTP混合物 模板DNA Mg2+ PCR反应条件 PCR的基本原理 PCR过程 PCR的特点 1 2 3 高温变性 低温退火 适温延伸 重复1~3步 94 25~30轮 温 形 D 度 72 N 成 目的DNA片

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