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中医药实验研究专业设计.ppt
中医药实验研究的专业设计 肝病研究所 徐列明 专业设计的定义 主要是运用专业理论及技术知识进行研究课题的设计。 必须紧紧围绕科学假说或要解决的问题,基于立项依据,制定研究方案或技术路线。 一、构思研究基本框架二、实验观察的具体内容和方法三、实验研究中要注意的问题 研究课题确立之后,要围绕科学假说,构思研究基本框架。 构思研究基本框架 课题名称 立项依据(背景资料) 科学假说(拟解决的关键科学问题) 研究目的 研究内容 研究方法 研究方案(或技术路线) 研究工作基础和条件 研究计划进度安排 课题组成员 研究经费 科学研究的指导思想和基本要求 指导思想 解放思想、实事求是、与时俱进 基本要求 科学性 先进性 实用性 可行性 创新点 设计前准备 大量阅读国内外专业文献 获得思路 专题检索 获得方法 查新检索 获得创新点 确立研究课题 一般选常见病、多发病 推荐选热点,也可选空白点或失败点 有利于中医学或中西医结合医学发展 社会效益和经济效益 拟解决的关键问题 一般为1~2个。 对基础研究来说,可以是假说本身,也可以是为证明假说所要解决的关键问题。 对应用研究来说,则是为获取新观点、新知识、新方法所要解决的关键问题。 拟解决的关键问题一直困惑设计者,需要根据实验的特点认真考虑这一试验设计的核心问题。 研究目标:为什么要做本项研究? 问题或假说:研究的动因。 课题名称:包括研究的主体、客体(和方法)。 研究内容:如何得到研究结果。 二、实验观察的具体内容和方法 对每一项具体的实验内容和方法从专业技术理论角度进行设计。即是从专业技术理论角度考虑该实验或试验观察应该怎么做?需要注意什么?怎样才能排除干扰因素,使实验更为合理,结果更具说服力? 实验设计中的整体观念 实验设计中的“整体观念”体现在考虑问题的全面性和严密性。 一种整体观念是“大呼隆”,选了大量的指标,应用各种技术方法,前人已做过的都要重复再现,全面开花。 另一种是一项研究只深入解决一两个问题,但把有关各方影响因素尽可能都考虑到,逐一证实或排除,得到明确结论。 Walter KOLCH . Biochem. J. (2000) 351, 289-305 TGF-β1的MAPK通路中的细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)通路与纤维化发生密切相关。 1、SA-B抑制TGF-β1刺激的HSC内ERK1/2的磷酸化 2 SA-B抑制TGF-β1刺激的HSC内MEK的磷酸化 3、SA-B对TGF-β1刺激的HSC内Raf的磷酸化无明显影响 实验观察对象 医学研究的实验观察对象一般分为人、动物和组织细胞三类。 实验对象应具备两个基本条件: ①对处理因素敏感; ②对处理因素的反应必须稳定。 体内实验和体外实验 体内实验(in vivo):实验对象是正常的实验动物、已制作成类似于人类疾病的模型动物、天然基因缺陷或基因变异的动物、转基因或基因剔除的动物等。 体外实验(in vitro):现在多指组织或细胞体外培养的一类实验,实验对象是培养的器官、组织、原代或传代培养的细胞或细胞株。 两种实验类型的特点和适用范围 体内实验 体外实验 实验周期 急性实验较短, 一般较短,但须重复。 慢性实验较长。 实验设备 较少需要。 需要细胞分离设备、超净 和耗材 工作台、培养箱和显微镜等, 用于培养的耗材量较大。 实验条件 受体内多系统的影响, 可控性强。 较难控制。 组内差异 存在个体差异, 同源细胞差异不明显, 样本例数需要较多。 样本例数需要少。 技术要求 需动物实验技术, 需细胞分离培养技术, 难度较低。 难度较高。 适用范围 药效学研究、毒理学研究, 大通量药物筛选、 整体水平上形态和功能方面 组织、细胞水平上发病机制、 的分子生物学和药理学研究。 分子生物学和药理学研究。 目前相当多的研究是两种实验研究互相交叉,例如应用克隆技术和转基因技术的应用。 利用体外实验的方法研究中药复方的药理作用。 从模型动物中分离细胞作体外研究。 不同的实验要解决的具体问题不同,须根据需要选择适当的实验类型。有部分初学者认为体外实验的水平比体内实验要高,这种观点是没有根据
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