脓汁和粪便标本中病原菌的检测-1教学材料.pptVIP

培养基的种类（按物理性状分类） 液体培养基:不含凝固剂(琼脂),用于增菌，纯培养,保种。 固体培养基:含1％～2％琼脂，用于分离培养,纯培养,保种。 半固体培基（琼脂高层）:含0.3％～0.5％琼脂，用于动力检测,保种。 营养肉汤 broth tube 琼脂斜面 agar slant 琼脂高层 agar deep Different forms of culture media. 培养基的种类（按用途分类）P3 基础培养基:含一般细菌生长繁殖所需的基本营养成分，可作为一些特殊培养基的基础成分，如普通平板。 营养培养基：在基础培养基中加入血液、生长因子等特殊成分，供营养要求较高的细菌和须要特殊生长因子的细菌生长，如血平板。 增菌培养基：促进目的菌的生长，适用于含菌量较少的标本，如葡萄糖肉汤。 选择培养基：在培养基中加入抑制剂抑制杂菌生长，有助于目的菌的生长，如EMB、SS平板。 鉴别培养基：利用细菌分解能力及代谢产物的不同，在培养基中加入特定的作用底物和指示剂，用来试验细菌的生化反应、代谢产物，如糖发酵管。 厌氧培养基：氧化还原电势低，表面用凡士林和石蜡封住，与空气隔绝，成为无氧环境，如庖肉培养基。 培养基的灭菌 在冷空气完全排尽的情况下，蒸汽压103.43 kPa ,温度可达到121.3℃ ,维持15～30分钟，可以杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。 基础培养基：121℃高压蒸汽灭菌15～30分钟。 含糖培养基：115℃灭菌15分钟。 鸡蛋、牛奶培养基:75～100℃30分钟，3次(1天1次)。 不耐高温的液体成分：滤菌器滤过除菌 EK型蔡氏滤器、 G5或G6玻璃滤器、0.45um或0.22um微孔滤膜。 琼脂平板 agar plate 含琼脂的培养基灭菌以后，冷却50～60℃（温度越高，冷凝水越多，越易污染 ），以无菌操作，倾注平皿10ml（直径7厘米平皿），琼脂凝固后形成琼脂平板。 平板主要用于细菌的分离培养和药敏试验。 平板储存待用或做细菌培养时，为什么要倒置？ ①防止平板水分蒸发丢失。 ②防止冷凝水滴于平板表面，影响单菌落形成。 ③…… 琼脂斜面 agar slant 含琼脂的培养基灭菌以后，趁热斜放，培基不超过试管长度的2/3，琼脂凝固以后形成一个倾斜的表面。 斜面主要用于纯菌移种和菌种保存。 斜面底部的冷凝水有利于纯菌移种、菌苔形成和菌种保藏。 实验分组（40人） 俩俩相对4人为一个小组,组号编在电源插座上。 每组按从前到后,从左到右的顺序，分别编号为甲、乙、丙、丁。 甲 乙 4 丙 丁 甲 乙 3 丙 丁 甲 乙 2 丙 丁 甲 乙 1 丙 丁 甲 乙 5 丙 丁 甲 乙 8 丙 丁 甲 乙 7 丙 丁 甲 乙 6 丙 丁 甲 乙 10 丙 丁 甲 乙 9 丙 丁 讲 台 左 右 实验分组（40人） 俩俩相对4人为一个小组,组号编在电源插座上。 每组按从前到后,从左到右的顺序，分别编号为甲、乙、丙、丁。 甲 乙 4 丙 丁 甲 乙 3 丙 丁 甲 乙 2 丙 丁 甲 乙 1 丙 丁 甲 乙 5 丙 丁 甲 乙 8 丙 丁 甲 乙 7 丙 丁 甲 乙 6 丙 丁 甲 乙 10 丙 丁 甲 乙 9 丙 丁 讲 台 左 右 实验室器材介绍 常用器材摆放顺序：电源插座→试管架→酒精灯→污物盘。 试管架上器材：靠近插座一侧第1列放置接种针,第2列放置 接种环，另一侧中间两行放置油性笔和打火机。 ※器材使用后，必须放回原处，依次摆整齐。 普通冰箱(3颗星***) 冷藏室(上柜）： 温度4～8℃，保存细菌培养物，培养基，常用菌种和抗菌素纸片等。 冷冻室（下柜）： 温度－18℃，保存诊断血清、血浆，长期保藏的抗菌素纸片。 卫生工具： 扫帚,拖布,撮箕,垃圾筐,放在冰箱和水池之间。 隔水式电热恒温培养箱：35～37℃， 一般细菌培养时间为18～24小时。 奥林巴斯 CX21型 生物显微镜 （实验柜内，每人一台） 注意：只能横放，不得竖放。