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常见的脂肪鉴定的试验步骤
* * 一、考纲要求: 1、理解所学实验的内容,包括实验目的、原理、方法和操作步骤,掌握相关的操作技能。 2、具备验证相关生物学事实的能力,并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理。 3、能对一些生物学问题进行初步的探究性研究。 二、考试范围: 实验1、书P17-19 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 实验2、书P30-31 高倍显微镜的使用和观察叶绿体和细胞质的流动 实验3、书P39-40 观察植物细胞的有丝分裂 实验4、书P46 比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率 实验5、书P47 探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用 实验6、书P53-54 叶绿体中色素的提取和分离 实验7、书P59-60 观察植物细胞的质壁分离和复原 实验8、书P79-80 植物向性运动的实验设计和观察 实验9、书P84 设计实验,观察生长素或生长素类似物对植物生长 发育的影响 实验10、书P87-88 动物饲喂小动物的实验(选做) 实验11、书P101 观察被子植物的花粉管 实验12、补做:温度及pH对酶活性的影响 实验复习方法概述: 1、熟记基本的实验操作方法、基本实验仪器的使用要点和基本实验试剂的用途。 2、明确科学研究的方法、原则和一般程序 3、掌握实验设计的基本原则。 4、明确实验设计的一般程序: (了解题目的要求)、明确实验目的、分析实验原理、确定实验思路、选择实验器材、设计实验步骤、预测结果与分析 5、将每一章节的相关实验进行实验设计方面的分析 四. 复习重点: 1、 实验设计中的注意要点 2、实验设计的过程 3、实验分析思路 五. 学习难点: 1、实验设计的合理性和科学性 2、实验结果的分析 一、物质的鉴定实验 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定(实验1) (一)糖类物质的鉴定 1.还原性糖的鉴定 还原性糖与非还原性糖: 还原性糖:有还原性基团——游离醛基或酮基的糖; 如 、乳糖、纤维二糖。 非还原性糖: 。 鉴定还原糖的试剂: 斐林试剂:由质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下,能够生成砖红色的CuO2沉淀,而葡萄糖本身被氧化成葡萄糖酸。 溶液的颜色变化过程为: 浅蓝色—棕色—砖红色(沉淀)。 葡萄糖、果糖、麦芽糖 淀粉、纤维素、蔗糖、糖元 鉴定可溶性还原糖的实验材料 为什么不用双子叶植物叶? 双子叶植物中,光合作用的主要产物葡萄糖形成后合成为淀粉,暂时储藏在叶子内,因此最好不用双子叶植物的叶子作实验材料。 为什么不用单子叶植物叶? 有些单子叶植物,如韭菜、鸢尾,并不将光合作用的初始产物转变为淀粉,因此叶内含有大量的可溶性单糖,但是,由于叶片中叶绿素的颜色较深,对于鉴定时的颜色反应起着掩盖作用,导致实验现象不明显,因此,也不宜用单子叶植物的叶子作实验材料。 本实验最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官),而且组织的颜色较浅,或近于白色的, 如:苹果和梨的果实。经试验比较,颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。 2.鉴定葡萄糖的方法 尿糖试纸、血糖快速检测仪的原理:葡萄糖氧化酶催化葡萄糖形成葡萄糖酸、过氧化氢;过氧化氢分解产生氧气,使指示剂显示不同的颜色。 3.鉴定淀粉的方法 碘—碘化钾溶液 (二)脂肪的鉴定 1.苏丹III或苏丹IV 染色时间 脂肪滴颜色 橘黄色 红色 2~3分钟 1分钟 苏丹III 苏丹IV 2.鉴定脂肪的实验材料 最好选择富含脂肪的种子,如花生种子(取其子叶)。 3、脂肪鉴定的实验步骤: 取材-制片-观察-结论 取材:将子叶削成薄片 制片:a:取理想的薄片 b:染色 c:去浮色 d:制成临时装片 观察:先低后高 结论: 实验关键: 子叶应切成薄片 (三)蛋白质(多肽、二肽)的鉴定 1.斐林试剂与双缩脲试剂有何区别? 呈紫红色 呈砖红色 颜色反应 先加A液,与样液混匀后滴加B液 现配现用;混合均匀;隔水加热; 使用方法 双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)能与铜离子作用,形成紫色或紫红色的络合物,这个反应叫做双缩脲反应 Cu(OH)2被还原为砖红色的Cu2O 发生的 反应 0.1g/mL的氢氧化钠溶液(A液) 0.01g/mL的硫酸铜溶液(B液) 0.1g/mL的氢氧化钠溶液 0.05g/mL的硫酸铜溶液 成分 鉴定蛋白质、二肽及多肽 鉴定可溶性还原糖的存
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