高效固氮芽孢杆菌筛选及其生物学特性.PDF

中国农业科学 2009,42(6):2043-2051 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.06.021 高效固氮芽孢杆菌筛选及其生物学特性 孙建光，张燕春，徐 晶，胡海燕 （中国农业科学院农业资源与农业区划研究所/农业部作物营养与施肥重点实验室，北京 100081 ） 摘要：【目的】筛选高效固氮芽孢杆菌，研究固氮微生物固氮酶活性、竞争适应能力与接种固氮效能的关系， 探讨接种固氮芽孢杆菌对根际细菌多样性的影响。【方法】采用无氮培养基富集、加热筛选固氮芽孢杆菌。乙炔还 原法测定固氮酶活性，采用盆栽小白菜选育高效固氮芽孢杆菌、研究菌种竞争适应能力与接种固氮效能。通过形 态、生理生化特征和 16S rDNA 序列分析鉴定菌种。【结果】筛选到了 3 株固氮酶活性相对较高、固氮能力较强的 菌株 GD062、GD082 和 GD282，初步鉴定为芽孢杆菌 Bacillus spp.和类芽孢杆菌 Paenibacillus sp.。进一步的 研究结果表明菌株 GD082 竞争适应能力较强，在盆栽试验自然土壤条件下接种固氮效能与施用化肥试验处理效果 相当，可望进一步研发用于生产固氮微生物肥料。试验结果同时显示，供试菌株的固氮酶活性与其接种固氮效能 并不直接相关，菌株的竞争适应能力对接种固氮效能影响很大，接种固氮芽孢杆菌使小白菜根际土壤细菌多样性 显著增加。【结论】接种固氮微生物为农作物提供氮素养分具有生产实践意义。高效固氮菌种的筛选是一个复杂的 过程，菌株的固氮酶活性与其接种固氮效能并不直接相关，竞争适应能力对接种固氮效能影响很大。筛选到的芽 孢杆菌 GD082 固氮酶活性较高、固氮能力较强、竞争适应能力很强，可望进一步研发成为优良的固氮微生物肥料 生产用菌种。 关键词：生物固氮；芽孢杆菌；菌种筛选；微生物肥料 Isolation and Biological Characteristic Investigation on Efficient Nitrogen-Fixing Bacilli SUN Jian-guang, ZHANG Yan-chun, XU Jing, HU Hai-yan (Institute of Agricultural Resources and Regional Planning, Chinese Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Crop Nutrition and Fertilization of Ministry of Agriculture, Beijing 100081) Abstract: 【Objective 】 Efficient nitrogen-fixing bacilli were isolated, and the relationships between microbial nitrogenase activity, competition ability and inoculation effect were investigated. The influence of inoculating nitrogen-fixing bacillus on the bacterial community in crop rhizosphere was explored. 【Method 】 Nitrogen-free medium was used to isolate nitrogen-fixers and heat treatment was used for the nitrogen-fixing bacilli. Nitr