胡杨大片段基因在拟南芥中地表达及耐盐性分析.docVIP

胡杨大片段基因在拟南芥中的表达及耐盐性分析-园林 胡杨大片段基因在拟南芥中的表达及耐盐性分析 doi：10.13360/j.issn.1000-8101.2015.04.011中图分类号：S718.46 胡杨大片段基因在拟南芥中的表达及耐盐性分析 张瑷，何丽君*，黄鹏，王文娟，杨海峰 （内蒙古农业大学，呼和浩特 010019） 摘要：以根癌农杆菌为介导，利用拟南芥作为受体植物进行胡杨基因大片段的转化。共将1 570个胡杨BIBAC 克隆进行了拟南芥转化实验，其中利用抗生素平板筛选，有590个克隆得到了转基因拟南芥，利用PCR进行检测后得到结果跟卡那平板筛选后的结果吻合。对得到的转基因拟南芥进行不同浓度NaCl筛选（150和175 mmol/L），共得到10个有耐盐表现的克隆；进一步验证试验证实，有两个株系具有稳定的耐盐表现，分离出T2纯合系。对于所获得的转化子进行播种观察得到了两个表型变化的突变体。本研究对于解析胡杨耐盐机理及挖掘胡杨耐盐基因资源具有重要意义。 关键词 ：拟南芥；转基因；盐胁迫；阳性转化子 收稿日期：2015-01-14 修回日期：2015-03-12 基金项目：国家自然科学基金项目；内蒙古自治区高等学校科学研究项目（NJZY13076）；中国林业科学研究院中央级公益性科研院所基本科研业务专项资金项目（CAFYBB2011001）。 作者简介：张瑷（1987-），女，硕士生，主要从事林木遗传育种等方面的研究。通信作者：何丽君，女，副教授。Email：[emailprotected] The expression of Populus euphratica large fragment gene in Arabidopsis and salt tolerance analysis ∥ ZHANG Ai， HE Lijun， HUANG Peng， WANG Wenjuan， YANG Haifeng Abstract：Mediated with Agrobacterium tumefaciens， we took Arabidopsis thaliana as the receptor plant and transferred large gene fragments of Populus euphratica into it. Totally， 1 570 BIBAC clones of P. euphratica were transferred in this research and 590 from these clones got the Arabidopsis thaliana transformants by screening on antibiotic containing plate. Then PCR identification screening proved the results from antibiotic screening. These transformants of A.thaliana were screened on the different salt stresses of NaCl （150 and 175 mmol/L and 10 clones could express salt tolerance. In these clones， two among them showed the stable salt tolerance and homozygote were gotten in the further experiments .The phenotype change of 2 mutant strains were found in seeding experiments. The research would be meaningful for salttolerant mechanism and genetic resources of P.euphratica. Key words： Arabidopsis；transgenic；salt stress；positive transformation Authors’ address： Inner Mongolia Agricultural University， Hohhot 010019， China 由于拟南芥包含了所有开花植物的基因密码，基因组在已知高等植物中最小，基因重复序列最低，生命周期短［1-2］等特点，长期以来被视为传统遗传学和分子生物学研究的模式植物材料［3］。