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不同类型叶用芥菜核型剖析 　　摘 要：采用根尖染色体压片技术对大叶芥、小叶芥和白花芥的染色体核型进行分析。分析结果表明，大叶芥染色体数目为2n=4x=AABB=36，核型公式为2n=4x=14m+18sm+4st，核不对称系数为66.33%，属于“3B”型；小叶芥染色体数目为2n=4x=AABB=36，核型公式为2n=4x=30m+4sm+2st，核不对称系数为58.21%，属于“2B”型；白花芥染色体数目为2n=4x=AABB=36，核型公式为2n=4x=22m+12sm+2st，核不对称系数为61.61%，属于“2B”型。3种不同类型叶用芥菜没有出现染色体数目的变化，都属于小染色体，多数染色体为中部着丝点，只有在染色体长度、着丝点位置、核不对称系数等核型组成上出现了细微的差异，说明3种不同类型叶用芥菜间具有相似的遗传特性。核不对称系数，大叶芥＞白花芥＞小叶芥，在进化关系上，小叶芥属于相对原始的类型，大叶芥和白花芥进化程度更高。 　　关键词：叶用芥菜；染色体；核型分析 　　中图分类号：S637 文献标识码：A 文章编号：1001-3547（2014）12-0013-05 　　染色体核型分析是指对细胞染色体的数目、形态、长度、带型和着丝粒位置等内容的分析研究。一种生物的染色体核型是相对固定的，因此可将它作为植物学分类及遗传研究的一个重要参考指标。种与种之间的差异可以从细胞学水平来鉴定，为物种间的遗传距离、亲缘关系和进化研究提供客观依据[1]。芥菜（Brassica juncea Czern. et Coss.）为十字花科芸薹属一年或二年生草本植物。中国是芥菜类蔬菜种质资源最丰富的国家之一，具有根芥、茎芥、叶芥和薹芥等类型[2]。大叶芥、小叶芥、白花芥均属于叶用芥菜，以其肥大的叶片、叶柄或叶球为产品器官，可以供腌制、鲜食或饲料。芥菜的起源、分类、花粉形态、生理特性和遗传多样性方面已有较多报道[3~7]。在染色体核型方面，童南奎[5]对芥菜的6个变种、王建波等[8]对大头芥等7个变种进行了分析，但将叶用芥菜核型进行比较分析鲜见报道。为此，本研究采用根尖染色体压片技术对不同类型叶用芥菜的染色体核型进行分析，探讨不同类型叶用芥菜的遗传差异，以期为叶用芥菜种质资源的研究与利用提供细胞学依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　供试材料为DY10（大叶芥，来源于云南省弥渡县）、X2（小叶芥，来源于四川省泸州市）和BH2（花叶芥，来源于湖北省鄂州市）。 　　1.2 试验方法 　　取饱满种子，经浸种后播在铺有湿滤纸的培养皿中，25℃恒温培养箱培养，待根尖长0～1.5 cm时，剪取根尖，置饱和α-溴萘溶液中预处理4 h，再置于卡诺氏固定液Ⅱ（乙醇∶氯仿∶冰乙酸=6∶3∶1）中固定24 h，取出根尖用蒸馏水冲洗，用1 mol/L盐酸在60℃水浴锅中解离6～8 min，将根尖用蒸馏水清洗2次，然后将材料置于席夫试剂中染色，待根尖染成红色时将其取出，切取根尖分生组织2 mm左右，加1滴卡宝品红后压片观察。 　　染色体形态命名参照国际通用的Levan等[9]1964年的标准，染色体类型按照Stebbins[10]1971年提出的标准进行分类，以核型中染色体形态、着丝点位置、长度及臂比等主要特征进行分类。核型不对称系数计算用Arano [11]1956年的方法。 　　2 结果与分析 　　2.1 大叶芥的核型分析 　　大叶芥的染色体、核型和核型模式见图1~3，核型参数见表1。分析得到大叶芥染色体数目为 　　2n=4x=AABB=36，核型公式为2n=4x=14m+18sm+4 st，根据Levan等[9]的染色体分类标准，第5，6，7，8，16， 　　17和18号染色体为中间着丝粒染色体（m），第1，2，3，9，10，11，13，14和15号染色体为亚中间着丝粒染色体（sm），第4和12号染色体为亚端着丝粒染色体（st）。染色体总长度为24.95 μm，长度变化范围为0.83～2.15 μm，染色体相对长度变化范围为3.31%～8.62%，最长染色体与最短染色体比值为2.59，臂比值在1.10～4.25。核不对称系数为66.33%，染色体长度比为2.59，按照Stebbins[10]（1971）的核型分类标准，大叶芥的染色体核型在遗传进化上属于“3B”型。 　　2.2 小叶芥的核型分析 　　小叶芥的染色体、核型和核型模式见图4~6，核型参数见表2。分析得到小叶芥染色体数目为2n=4x=AABB=36，核型公式为2n=4x=30m+4sm+2st，根据Levan等[9]的染色体分类标准，第1，4，5，6，7， 　　8，9，10，11，12，14，15，16，17和18号染色体为中间着丝粒染色体，第3和13号染