纳米金及其标记细胞色素p450.docVIP

第 ４５ 卷 第 １１ 期 ２００７ 年 １１ 月 山 东 大 学 学 报 （ 医 学 版 ） ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＳＨＡＮＤＯＮＧ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（ ＨＥＡＬＴＨ ＳＣＩＥＮＣＥＳ） Ｖｏｌ ． ４５ Ｎｏ． １１ Ｎｏｖ ． ２００７ 文 章 编 号 ： １６７１ － ７５５４（ ２００７） １１ － １０８８ － ０４ 纳 米 金 及 其 标 记 细 胞 色 素 Ｐ４５０ 的 近 红 外 荧 光 性 质 的 研 究 尹 洪 银 ， 张 春 玲 ， 于 江 ， 李 宁 ， 高 希 宝 （ 山 东 大 学 公 共 卫 生 学 院 ， 济 南 ２５００１２） 摘 要 ： 目 的 研 究 纳 米 金 及 其 标 记 细 胞 色 素 Ｐ４５０ 在 ８１１ ｎｍ 近 红 外 荧 光 光 谱 的 特 性 ， 并 对 其 荧 光 增 强 机 理 进 行 深 入 的 探 讨 。 方 法 用 不 同 量 的 柠 檬 酸 三 钠 在 煮 沸 搅 拌 条 件 下 还 原 氯 金 酸 制 得 不 同 粒 径 的 纳 米 金 ， 利 用 纳 米 金 易 与 蛋 白 结 合 的 性 质 标 记 细 胞 色 素 Ｐ４５０。 用 紫 外 － 可 见 吸 收 光 谱 仪 、 投 射 电 子 显 微 镜 以 及 荧 光 光 谱 仪 ， 研 究 纳 米 金 及 其 标 记 细 胞 色 素 Ｐ４５０ 的 光 谱 性 质 。 结 果 透 射 电 子 显 微 镜 显 示 随 着 还 原 剂 柠 檬 酸 钠 加 入 量 的 增 加 ， 形 成 的 纳 米 金 的 颗 粒 逐 渐 减 小 。 紫 外 － 可 见 吸 收 光 谱 显 示 大 颗 粒 纳 米 金 只 在 ２５０ ｎｍ 处 有 吸 收 ， 当 纳 米 金 粒 径 的 减 小 至 ２１ ｎｍ 时 ， 在 ５２５ｎｍ 处 出 现 新 的 吸 收 峰 。 荧 光 光 谱 仪 显 示 以 ５３８ ｎｍ 为 激 发 波 长 ， 纳 米 金 在 ８１１ ｎｍ 处 有 荧 光 发 射 峰 ， 且 标 记 蛋 白 后 荧 光 强 度 增 加 。 结 论 通 过 对 纳 米 金 近 红 外 荧 光 性 质 的 研 究 ， 可 利 用 纳 米 金 的 近 红 外 荧 光 性 质 作 为 探 针 检 测 细 胞 色 素 Ｐ４５０。 关 键 词 ： 纳 米 金 ； 近 红 外 荧 光 ； 细 胞 色 素 Ｐ４５０ 中 图 分 类 号 ： Ｒ１１５ 文 献 标 志 码 ： Ａ Ｉｎｆｒａｒｅｄ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｏｆ ＡｕＮＰｓ ａｎｄ ｉｔｓ ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ｂｙ Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｐ４５０ ＹＩＮ Ｈｏｎｇｙｉｎ， ＺＨＡＮＧ Ｃｈｕｎｌｉｎｇ， ＹＵ Ｊｉａｎｇ， ＬＩ Ｎｉｎｇ， ＧＡＯ Ｘｉｂａｏ （ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ， Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｊｉｎａｎ ２５００１２， Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｉｎｆｒａｒｅｄ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｇｏｌｄ ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ （ ＡｕＮＰｓ） ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｌａｂｅｌｅｄ Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｐ４５０ ａｔ ８１１ ｎｍ， ａｎｄ ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｉｔｓ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ． Ｍｅｔｈｏｄ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｉｚｅｓ ＡｕＮＰｓ ｗｅｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｂｙ ａｄｄｉｎｇ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｔｒｉｓｏｄｉｕｍ ｃｉｔｒａｔｅ ｔｏ ｒｅｄｕｃｅ ｔｈｅ ｃｈｌｏｒｏａｕｒｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ａ ｂｏｉｌｅｄ ａｎｄ ｓｔｉｒｒｅｄ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ， ａｎｄ ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｗａｓ ｌａｂｅｌｅｄ ｂｙ ＡｕＮＰｓ ． Ｔｈｅ ＡｕＮＰｓ ａｎｄ ｉｔｓ ｌａｂｅｌｅｄ Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｐ４５０ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ＵＶｖｉｓｉｂｌｅ ｌｉｇｈｔ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｓｐｅｃｔｒｕｍ， ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ （ ＴＥＭ） ａｎｄ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｓｐｅｃｔｒｕｍ． Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｗｉｔｈ ａｎ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔｒｉｓｏｄｉｕｍ ｃｉｔｒａｔｅ， ｔｈｅ ＡｕＮＰｓ ｂｅｃａｍｅ ｓｍａｌｌｅｒ ｕｎｄｅｒ ＴＥＭ ． Ｔｈｅ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｐｅａｋ ｏｆ ｔｈｅ ｌａｒｇｅｒ ＡｕＮＰｓ ｗａｓ ａｔ ２５０ ｎｍ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ＵＶｖｉｓｉｂｌｅ ｓｐｅｃｔｒｕｍ， ａｎｄ ｗｈｅｎ ｔｈｅ Ａｕ