广东与海南养殖罗非鱼无乳链球菌分离、鉴定与特性分析.PDFVIP

微生物学通报 MAY 20, 2010, 37(5): 766774 Microbiology China © 2010 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 研究快报 广东与海南养殖罗非鱼无乳链球菌的 分离、鉴定与特性分析 1* 1,2 1 1 1 1 1 卢迈新 黎炯 叶星 邓国成 江小燕 田园园 赖翠玲 (1. 中国水产科学研究院珠江水产研究所 广东 广州 510380) (2. 上海海洋大学水产与生命学院 上海 201306) 摘 要: 从中国广东、海南罗非鱼主养区发生爆发性疾病的多个养殖场的罗非鱼病鱼体上, 分离 到多株致病菌株。人工感染试验显示分离菌株具有较强的致病力, 有多株经腹部注射分离细菌浓 度为 1 × 106 CFU/mL 时可使100%的受感染鱼死亡, 选择其中7 株强毒株进行药物敏感性实验与 鉴定。不同菌株对药物敏感性存在一定的差异但与菌株来源无相关性, 29 种抗生素中对13 种敏感、 7 种不敏感、9 种存在菌株的差异。各分离菌株均为革兰氏阳性菌, 呈β溶血。采用链球菌快速鉴 定系统 ID 32 STREP 、Lancefield 分析及多项补充生理生化鉴定结果, 初步判断为无乳链球菌 Streptococcus agalactiae 。PCR 扩增 16S rRNA 基因和GBS-specific gene cfb (CAMP factor)基因的 全长序列, BLAST 分析显示所有菌株的 16S rRNA 基因与GenBank 上登录的无乳链球菌的相应序 列高度同源 ( 99.8%), 各分离菌株间的 16S rRNA 基因序列也高度同源 ( ≥99.9%100%)。各菌 株 cfb 基因序列高度同源 (100%), BLAST 显示与已知无乳链球菌的相应序列也具有高度同源性 ( ≥99.0%)。综合上述实验结果, 可判定广东与海南罗非鱼主养区 2009 年夏季发生的罗非鱼爆发 性疾病的病原菌为无乳链球菌。 关键词: 罗非鱼, 无乳链球菌, 致病性, 生理生化, 16S rRNA, cfb 基因, 药物敏感性 Identification and Characterizations of Streptococcus agalactiae Isolated from Tilapia Cultured in Guangdong and Hainan Provinces LU Mai-Xin1* LI Jiong1,2 YE Xing1 DENG Guo-Cheng1 JIANG Xiao-Yan1 TIAN Yuan-Yuan1 LAI Cui-Ling1 (1. Pearl River Fishery Research Institute, CAFS, Guangzhou, Guangdong 510380, China) (2. College of Fisheries Life, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China) Abstract: Bacteria pathogens were isolated fr