DNA的损伤和修复学习资料.pptVIP

5-BrU : G : A 烯醇式enol Br OH H O Br 酮式Keto H O AGCTTCCTA TCGAAGGAT AGCTBCCTA TCGAAGGAT 酮式5-BrU的渗入 AGCTBCCTA TCGAAGGAT AGCTCCCTA TCGAGGGAT 第二轮复制 A·T?G·C 转变 AGCTBCCTA TCGAGGGAT AGCTTCCTA TCGAAGGAT 第一轮复制 酮式到稀醇式的转变 烯醇式渗入为 G·C?A·T 转变 * 2、 碱基的化学修饰剂 又称化学突变剂：指对DNA链中的碱基的修饰,改变其配对性质,进而改变DNA结构的化合物. 亚硝酸（nitrous acid HNO2） 羟氨（hydroxylamine HA） 甲磺酸乙酯（ethyl mathanesulfonate EMS） N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍 （N-mathyl-N’-nitro-N-nitrosoguanidion NNG） * （a）亚硝酸修饰G、C、A；（b）羟基修饰C；（c）甲基磺酸乙酯修饰T（引自Russell,1992）. * 3、嵌入染料对DNA的损伤作用 吖啶橙 (Acridine Orange AO) 扁平染料分子 溴化乙锭 (Ethidium Bromide EB ) -ATTTTTCG - -TAAAAAGC- -A TTTCG - -T AAAGC- TAO T -AT EB TTTTCG- -TA 分子插入 AO EB -ATTTCG - -TAAAGC- -ATX’TTTTCG- -TAX AAAAGC- X AAAAGC- 结果产生－－－移框突变 * 二、DNA损伤的类型 DNA分子中的碱基、核糖和磷酸二酯键等均是DNA损伤作用的靶点。 常见的损伤有:碱基脱落、碱基破坏、嘧啶二聚体形成、单链和双链DNA断裂、DNA交联、DNA-蛋白质交联等。 * （一） 碱基和核糖的破坏 由于碱基或者核糖的损伤，在DNA链上形成不稳定位点，最终可导致DNA链的断裂。 * * DNA分子上的碱基错配称点突变(point mutation)。 发生在同型碱基之间，即嘌呤代替另一嘌呤，或嘧啶代替另一嘧啶。 1. 转换 发生在异型碱基之间，即嘌呤变嘧啶或嘧啶变嘌呤。 2. 颠换 （二）错配 * 镰形红细胞贫血病人Hb (HbS) β亚基 N-val · his · leu · thr · pro · val · glu · · · · · · C 肽链 CAC GTG 基因 正常成人Hb (HbA)β亚基 N-val · his · leu · thr · pro · glu · glu · · · · · · C 肽链 CTC GAG 基因 * （三） DNA链断裂 磷酸二酯键的断裂和脱氧戊糖的破坏是引起DNA链断裂的直接原因。 碱基的破坏和脱落在DNA链上形成的不稳定位点是DNA链断裂的间接原因。 单链断裂（SSB）：一条链断裂的DNA双股螺旋 双链断裂（DSB）：两条链于同一处或紧密相邻处同时断裂。 * （四）DNA交联 链间交联：DNA双螺旋链上一条链上的碱基和另一条链上的碱基以共价键结合 链内交联：DNA分子中同一条链内的两个碱基以共价键结合 DNA－蛋白质交联：DNA和蛋白质以共价键结合 * 第二节 DNA损伤的修复 DNA损伤的修复：指纠正错配的碱基，清除DNA链上的损伤，恢复DNA正常结构的过程。 常见的DNA修复方式：直接修复、切除修复、错配修复和重组修复 * (一）直接修复 直接修复 细胞对DNA的某些损伤可以用很简单的方式加以修复在单一基因产物的催化下，一步反应就可以完成。这种修复方式叫直接修复。 包括：酶光学复活、嘌呤的直接插入、O6－甲基鸟嘌呤－DNA甲基转移、单链断裂重接等。 * 1）、酶学光复活（photo reactivation ） ----TT---- ----AA---- PR PR ----TT---- ----AA---- ----TT---- ----AA---- 可见光激活 识别 ----TT---- ----AA---- 释放 * 烷基化碱基可以直接修复 * 2）嘌呤的直接插入 嘌呤插入酶 受损嘌呤→APS →插入嘌呤（糖苷键） 嘌呤插入酶 K+ * 3）DNA单链断裂重接