《第章发酵用微生物》课件.pptVIP

如果要提高总的生产率则有必要缩短发酵周期。这就是要在产物合成速率较低时放罐。 延长发酵虽然能提高产物浓度，但产率下降，且消耗电力，成本提高。 放罐时间对下游工序有很大影响。 放罐时间过早，会残留过多的养分，如糖、脂肪、可溶性蛋白等，对提取不利，这些物质能增加乳化作用或干扰树脂的交换； 放罐时间太晚，菌丝自溶，不仅会延长过滤时间还会使一些不稳定的抗生素单位下跌，扰乱提取工段的作业计划。 放罐临近时，加糖、补料或消沫剂都要慎重，因残留物对提炼有影响 补料可根据糖耗速度来计算放罐时允许残留量来加以控制，一般在放罐前16h左右便停止加糖或消沫剂 判断放罐的指标主要有产物浓度、过滤速度、氨基氮、菌丝形态、pH值、培养液的外观、粘度等， 菌体自溶前总有些迹象，如氨基氮开始升高，pH上升，菌丝碎片增多，粘度增加，过滤速度降低，最后一项对染菌罐尤为重要。 绝大多数掌握在菌丝开始自溶前，极少数则在菌丝部分自溶后，以便抗生素从菌丝体内释放出来。总之，发酵终点的判断需综合多方面的因素统筹考虑。 2、异常发酵的处理 在发酵过程中，常见的异常现象有：发酵液转稀、发酵液过浓、糖耗缓慢和pH不正常等情况。 发酵液转稀： 是指发酵尚未进入放罐阶段，发酵液就异常得稀。 其原因，除了因噬菌体污染外，尚有其它一些未知的因素所造成。 如果变稀不是由于噬菌体的原因，那么在刚出现变稀苗头时，及时补充适当的氮源可以促使繁殖新菌丝，使发酵恢复正常。有些抗生素，补入碳源也可以防止变稀。 发酵液过浓： 主要是由于发酵液中氮源过多，造成菌丝浓度大大增加，从而降低发酵液中溶解氧的浓度，影响发酵的正常进行。 这种情况下，可以向发酵液中补入大量的水，除了菌体浓度稍加稀释外，还可以降低发酵液的粘度，从而改善发酵条件。 糖耗缓慢： 原因很多。如产生菌的孢子和种子质量不好、培养基消毒不合格，以及培养基中磷酸盐浓度下降都可以产生这种现象。 当出现糖耗缓慢时，可以补充适量的合适氮源或一部分磷酸盐。此外，还可以用提高发酵温度的方法来促使糖耗的加快。 pH值不正常： 通常选用的发酵培养基，pH都能控制在合适的范围内，以保证使其易于菌体的生长和产物的合成。 由于原料的质量、用水的pH值和培养基的灭菌质量都可以引起发酵液的pH变化； 发酵过程的控制也可以造成pH波动，如空气流量太大可以促使pH上升，加糖、加油过多或过于集中可以引起pH下降等。 当发现发酵液的pH不正常时，可以加入酸或碱来调节，最好是加入一些生理酸性或碱性盐或缓冲液来调节。 Ⅱ、 发酵工艺条件的调控 微生物发酵过程也就是微生物的反应过程。就是研究微生物群体在反应过程中的基本规律和控制方法，其目的都是为了提高微生物的过量生产，提高生产效率。 基本内容：发酵过程中温度的控制、pH值、溶氧、泡沫以及基因工程菌的培养。 （Ⅰ）.发酵过程中温度的变化及控制 一、发酵过程中的热源 热源：发酵过程中引起发酵液温度变化的原因。 O发酵热 = O生物热 + O搅拌热 + O蒸发热 + O辐射热 生物热 微生物在生长过程中，由于培养基中的营养性物质：糖、蛋白质、脂肪等被氧化，同时产生大量的热量，这些热量一部分用于合成高能物质（ATP\GTP）等，这些高能物质用于菌体自身的生长、繁殖上；剩余的另一部分，则以热的形式散发出来，其表现在外观上，就是使培养基的温度升高，这一部分热量称之为:生物热 概念： 菌体生长过程中直接释放到体外的热能。 影响因素： 培养基成分：越丰富，生物热越多 菌体浓度、呼吸强度：越大，生物热越多 不同生长阶段：生物热也不同 发酵热平衡的主要依据：对数期的生物热 具有强烈的时间性： 不同的生长时期，底物 消耗的水平不同则产生的…… 与微生物生长过程中的 供氧水平有着直接的关系 生物热的特点： 搅拌热 由于机械搅拌,通气式发酵罐在运行过程中，搅拌浆作比较剧烈的运动，造成液体之间、液体与搅拌浆等设备之间的摩擦，会产生大量的热量 蒸发热 生物反应器在运行过程中，空气进入反应器与发酵液进行长时间的气、液接触，除部分的氧被利用以外，大部分的气体（称为尾气）仍旧排放出反应器，由于尾气在与发酵液接触的过程中实际上在进行质量的传递，使进入的空气的湿度增加，水分随着尾气一起被排除，同时伴随热量传递，这一部分热量，称之为蒸发热。 辐射热 辐射热：指反应器内部的温度与反应器的环境温度的差别造成的热量传递。 二、温度对发酵的影响 影响产物生成量 黑曲霉生长最适温度33-37℃，积累柠檬酸的最适温度在32℃ 青霉素产生菌：菌体生长是30℃ ，合成青霉素最适温度24.7℃ 温度影响合成方向 金色链霉菌在低于30℃时合成链霉素，温度到达35℃时，只产四环素 二、温度对发酵的影响 从酶促反应动力学方面