结核菌素临床意义---阴性T-SPOTTB.PPTVIP

接种卡介苗与自然感染阳性反应的主要区别 内容 接种卡介苗 TB感染 硬结直径 多为5—9mm 多为10—15mm 硬结颜色 浅红 深红 硬结质地 较软，边缘不整 较硬，边缘清楚 阳性反应持续时间 较短，2—3天即消失 较长，可达7—10天以上 阳性反应的变化 有较明显的逐年减弱倾向，一般3—5年内逐渐消失 短时间内反应无减弱倾向，可持续若干年，甚至终身 如果2年内PPD试验结果由阴性（-）转为阳性（+），或反应强度从原来硬结直径10mm增至10mm，提示新近感染过结核菌，或可能存在活动性病灶。 由于广泛推行卡介苗接种，结核菌素试验的诊断价值受到一定限制。接种卡介苗与自然感染阳性反应的主要区别（见表1） 阴性反应表明无结核菌感染，但应考虑以下情况： ①如受试者处于原发感染早期，尚未产生变态反应； ②正患严重结核病，机体已丧失反应能力； ③受试者正患其他传染病； 在以上情况下，均可暂时出现阴性反应。 结核菌素临床意义---阴性 T-SPOT.TB T: T细胞 SPOT：ELISPOT (enzyme-linked immunospot assay；酶联免疫斑点技术)是一种从单细胞水平检测分泌抗体或细胞因子细胞的免疫学新技术。原理是用抗体捕获培养细胞分泌的细胞因子，并以酶联斑点显色的方式将其表现出来。 TB：结核杆菌 该检测方法采用的结核杆菌特异性抗原为ESAT-6和CFP-10，其编码基因RD1在BCG（卡介苗）和绝大多数非结核杆菌中是缺失的，因此较好的避免了交叉抗原反应，提高了特异性。 原理 1.从全血中分离出外周血单个核细胞PBMCs 2.将样本加入反应孔，每个样本需要4个检测孔： ①空白对照为了判断非特异细胞的活化反应 ②结核特异抗原A，Panel A(ESAT-6) ③结核特异抗原B，Panel B(CFP 10) ④植物血凝素PHA对照，用于判断PBMC活性 3.孵育，刺激T细胞，分泌的细胞因子被预包被在反应孔膜上的特异抗体捕获 4. 洗涤、标记、计数。 结果 前提：通常正常结果，空白对照孔没有或有很少的斑点而植物血凝素PHA对照孔斑点数超过20个。 1.阳性结果： ①空白对照孔斑点数为0～5个且（抗原A或抗原B斑点数)-（空白对照孔斑点数）≥6 ②空白对照孔斑点数6-10个时且（抗原A或抗原B斑点数）≥2倍空白对照孔斑点数 2.阴性结果：不符合上述标准且对照孔正常 结果的诊断 阳性结果： 1.提示患者体内存在结核杆菌特异的效应T细胞，患者存在结核感染。但是否为活动性结核病，需结合临床症状及其它检测指标综合判断 2.T-SPOT.TB结果不能作为单独或是决定性的诊断结核病的依据。 3.虽然ESAT-6和CFP10在所有的BCG菌株，以及绝大多数环境分枝杆菌中缺失，但T-SPOT.TB的阳性结果有可能是其他分支杆菌的感染引起的。 阴性结果： 提示患者体内不存在针对结核杆菌特异的效应T细胞。如出现以下情况 ，阴性结果不能排除结核杆菌感染的可能 1、因感染阶段不同（如标本是在细胞免疫发生前获取的）引起的假阴性结果； 2、少数免疫系统功能不全的情况，如HIV感染者、肿瘤患者、儿童等；3、以及其它免疫学、实验非正常操作的差异。 检验结果 阴性对照孔 抗原A孔 抗原B孔 阳性对照孔 0 1 0 正常 1 10 23 正常 8 34 6 正常 7 6 21 正常 6 10 7 正常 阴性 阳性 阳性 阳性 阴性 儿童发热的结核感染筛查 原发性结核的辅助诊断 儿童肺外结核的鉴别诊断 卡介苗（BCG）接种—PPD结果不准确 儿童肺结核—干咳、不排痰，其他方法很难诊断肺外结核比例高 临床应用—儿科 发病机制 肺结核临床表现的病理基础 结核菌及其毒素的刺激 结核病灶的炎症反应 结核病灶的堵塞与压迫症状 女， 11月，488071 发热伴咳嗽10天入院 无BCG接种史， PPD 11mm 胸片支肺炎 CT右肺门淋巴结肿大 患儿父亲CT 左下肺背段空洞 肺结核的临床诊断标准 1 临床表现：发热咳嗽持续2周以上或喘息等 2 胸部X线检查有肺结核征象 3 活动性结核病接触史 4 结核菌素试验或T-spot阳性 5 痰、胃液或BAL结核杆菌涂片或培养阳性 6 抗结核治疗有效 7 除外其它肺部疾病如肺炎、肺肿瘤、肺囊肿、间质性肺部疾病等 8 肺组织病理检查符合肺结核特征 临床诊断：1+2+（3、4、6、7中的二项） 确诊： 1+2+ 5或8 * * CPC 王颖硕 浙江大学医学院附属儿童医院呼吸科 Email: wyshuo2222@126.com 病史资料 患儿吴某某，女性，10岁 因“反复咳嗽伴发热1