细菌的简单染色和革兰氏染色一试验目的要求.PDFVIP

细菌的简单染色和革兰氏染色细菌的简单染色和革兰氏染色 细菌的简单染色和革兰氏染色细菌的简单染色和革兰氏染色 (一一) 实验目的要求实验目的要求 一一 实验目的要求实验目的要求 1、学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法、学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。。 、、学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。。 2 、掌握葛兰氏染色法的基本原理及其在细菌分、掌握葛兰氏染色法的基本原理及其在细菌分 、、掌握葛兰氏染色法的基本原理及其在细菌分掌握葛兰氏染色法的基本原理及其在细菌分 类学上的重要性类学上的重要性。。 类学上的重要性类学上的重要性。。 （二（二））基本原理基本原理 （（二二））基本原理基本原理 1、用于生物染色的染料主要有碱性染料、用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性、酸性 、、用于生物染色的染料主要有碱性染料用于生物染色的染料主要有碱性染料、、酸性酸性 染料和中性染料三大类染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电。碱性染料的离子带正电 染料和中性染料三大类染料和中性染料三大类。。碱性染料的离子带正电碱性染料的离子带正电 荷，荷，能和带负电荷的物质结合能和带负电荷的物质结合。。 荷荷，，能和带负电荷的物质结合能和带负电荷的物质结合。。 2、革兰氏染色法所以能将细菌分为、革兰氏染色法所以能将细菌分为G+菌和菌和G— 、、革兰氏染色法所以能将细菌分为革兰氏染色法所以能将细菌分为 菌和菌和 菌，菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所 菌菌，，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所 决定的决定的。。 决定的决定的。。 （三（三））实验设备实验设备 （（三三））实验设备实验设备 1、活材料、活材料：： 、、活材料活材料：： 苏云金杆菌苏云金杆菌 （（Bacillus thuringiensis ）） 苏云金杆菌苏云金杆菌 （（ ）） 枯草杆菌枯草杆菌 （（Bacillus subtilis ）） 枯草杆菌枯草杆菌 （（ ）） 大肠杆菌大肠杆菌 （（Escherichia coli ）） 大肠杆菌大肠杆菌 （（ ）） 2 、染色液和试剂、染色液和试剂：： 、、染色液和试剂染色液和试剂：： 结晶紫结晶紫、卢哥氏碘液、卢哥氏碘液、、95%酒精酒精、蕃红、蕃红、复、复 结晶紫结晶紫、、卢哥氏碘液卢哥氏碘液、、 酒精酒精、、蕃红蕃红、、复复 红、红、二甲苯二甲苯、香柏油、香柏油 红红、、二甲苯二甲苯、、香柏油香柏油 （四（四））实验步骤与内容实验步骤与内容 （（四四））实验步骤与内容实验步骤与内容 1、简单染色、简单染色：： 、、简单染色简单染色：： （（1）涂片）涂片 （（））涂片涂片 （（2 ）晾干）晾干 （（））晾干晾干 （（3 ）固定）固定 （（））固定固定 （（4 ）染色）染色 （（））染色染色 （（5 ）水洗）水洗 （（））水洗水洗 （（6 ）干燥）干燥 （（））干燥干燥 （（7 ）镜检）镜检 （（））镜检镜检 2、革兰氏染色、革兰氏染色 、、革兰氏染色革兰氏染色 1．1．制片制片 11．．制片制片 2．2．初染初染 22．．初染初染 3．3．媒染媒染 33．．媒染媒染 4．4．脱色脱色 （关键（关键）） 44．．脱色脱色 （（关键关键）） 5．5．复染复染 5