应用RAPD技术进行白榆种群遗传多样性的-研究.pdfVIP

摘 要 本研究以科尔沁沙地和浑善达克沙地的 6 个天然白榆种群为研究对象，采用 RAPD 分子标记技术，在 DNA 水平上对天然白榆的遗传多样性进行分析研究，揭示内蒙古自 治区榆树的遗传变异状况，从而为榆树遗传资源的科学保护、利用和遗传改良提供科 学依据，以最大限度的保护与开发利用内蒙古自治区丰富的榆树遗传资源。 通过对天然白榆 RAPD 反应体系的随机引物浓度、模板 DNA 用量、dNTP 浓度、Taq 2+ DNA 聚合酶浓度和 Mg 浓度等进行梯度试验，建立了适合白榆 RAPD 扩增的最佳反应体 系：TaqDNA 聚合酶 1U，dNTP 0.2mM，Mg2+ 2.0mM，引物 1mM，1³Buffer2.5μL，模 板 DNA 30ng，总体积 25μL 反应体积。扩增程序：94℃预变性 3min；94℃变性 1.0min， 37℃退火 1.5min，72℃延伸 1.5min，40 个循环；72℃延伸 5min。 从 35 条引物中筛选出扩增多态性较多且扩增产物稳定的 RAPD 引物 17 条。对 6 个白榆种群的 180个叶片样品的基因组 DNA 进行扩增，共检测到 181 个位点，多态位