《重金属铬对鲤鱼肝脏过氧化氢酶影响的体外实验研究》》-毕业论文.docVIP

重金属铬对鲤鱼肝脏过氧化氢酶活力的影响 PAGE \* MERGEFORMAT 3 精品 本科毕业论文 重金属铬对鲤鱼肝脏过氧化氢酶影响的体外实验研究 学生姓名： 指导教师： 所在学院：城市与环境科学学院 所学专业：生态学 中国·长春 摘 要 本文研究了铬中毒后的鲤鱼肝脏中过氧化氢酶活力的影响，结果表明受水中铬离子的影响，鲤鱼肝脏内的过氧化氢酶活力在低浓度的铬离子的作用下，受到刺激作用，活力增大，而随着毒物浓度的继续增大，酶活力则开始呈下降趋势。 关键词 铬 鲤鱼 过氧化氢酶 体外染毒 1.引言 重金属铬的化合物是环境的重要污染物之一。铬在工业中用途广泛，冶金、机械、医药、化工、油漆涂料等都需要铬，不锈钢中就含有12%铬，涉及面很广。〔1〕铬的生物学特性不仅与生物的种类、pH、温度等条件有关，而且与价态有密切关系。通常认为：金属铬、二价铬无毒，三价铬毒性很小，危害最大的是六价铬的化合物。〔2〕水体中铬污染物的主要来源为电镀铬厂、有关的颜料制造厂及制革厂排放的废水。〔3〕 污染水体的铬化合物中的铬有两种价态，三和六价，二者之间的相互转化随水体酸碱度及氧化还原条件而定。六价铬的毒性是三价铬毒性的100倍，三价铬可对胎儿产生致畸作用，而六价铬有致癌作用。从事铬化合物生产的工人肺癌发病率是正常组的几十倍。〔4〕目前动物实验表明，三价铬一样有致癌的危险性。 但是铬却是人体必需的微量元素之一，成年人每天对铬的正常摄入量需20—50微克，缺铬可引起脂肪增加、血液中胆固醇升高、糖尿病、动脉粥样硬化症等。〔5〕所以，研究铬的生物效应，具有极其重要的意义。 相关资料表明，水体中重金属污染具有以下特点〔6〕： （1）天然水体中只要有微量浓度的重金属即可产生毒性效应。 （2）某些重金属有可能在微生物作用下转化为金属有机化合物，产生更大的毒性。 （3）金属离子在水体中的转移和转化与水体的酸、碱条件有关，如六价铬在碱性条件下的转化能力强于酸性条件；二价镉离子在酸性条件下易于随水迁移，并易为植物吸收。 （4）水中的重金属可以通过食物链，成千上万地富集，而达到相当高的浓度，这样重金属能够通过多种途径（食物、饮水、呼吸）进入人体．甚至遗传和母乳也是重金属侵入人体的途径。 （5）重金属进入人体后，能够和生理高分子物质如蛋白质和酶等．发生强烈的相互作用而失去活性，也可能累积在人体的某些器官中，造成慢性累积性中毒。 可见重金属对生物界有着很重要的影响。虽然，国内外曾报道了重金属毒物对鱼，贝，虾等动物体内生化组分的影响研究，其中的铬的研究也不在少数〔7〕，但多为96h活体染毒后，进行LC50检测〔8〕，重金属对鲤鱼过氧化氢酶的离体实验研究尚很少见，即制备过氧化氢酶液，然后活体提取肝脏后进行的体外染毒方式。 过氧化氢酶普遍存在于动物、植物与微生物细胞内。它催化分解细胞代谢产生的H2O和还原某些其他氧化物，在调节细胞免于死亡过程中起重要作用。过氧化氢酶含有丰富的巯基，重金属可与酶的巯基或其他活性基因相互作用，从而改变酶的活性，呈现致毒作用。〔9〕 本文通过室内实验，对鲤鱼活体提取肝脏后进行的体外重铬酸钾染毒，初步探讨重金属铬对鲤鱼肝脏内过氧化氢酶活力的影响。 2.材料与方法 2.1 实验材料与器材、试剂 2.1.1材料 鲤鱼：试验用鱼购于长春市某水产养殖场，体重约一至两斤重，体长约25厘米。个体呈平均水平，健康适龄鱼。 2.1.2设备 = 1 \* GB3 ①玻璃匀浆器 = 2 \* GB3 ②解剖器具 = 3 \* GB3 ③普通台式离心机 = 4 \* GB3 ④定时钟 = 5 \* GB3 ⑤恒温水浴 = 6 \* GB3 ⑥滴定管（10ml，酸式） = 7 \* GB3 ⑦碘量瓶（100ml） 2.1.3试剂 = 1 \* GB3 ①0.5mol.L-1H2SO4 = 2 \* GB3 ②10% KI = 3 \* GB3 ③0.01 mol.L-1 Na2S2O3 = 4 \* GB3 ④0.01 mol.L-1,PH6.8磷酸缓冲液。（A:称取1.3610g的KH2PO4溶至1OOOml， B:称取3.5816g的Na2HPO4溶至1OOOml 。取A与B大致相同体积配成PH6.8的磷酸缓冲液） = 5 \* GB3 ⑤ H2O2磷酸缓冲液。取1ml30%的H2O2试液，用0.01 mol.L-1，PH6.8的磷酸缓冲液稀释至1OOOml。 = 6 \* GB3 ⑥淀粉指示剂。取0.3g可溶性淀粉，以少量冷蒸馏水拌匀，倒入沸水中，冷却后，加0.1g的Na2CO3，用蒸馏水稀释至50ml = 7 \* GB3 ⑦1%钼酸铵溶液 = 8 \* GB3 ⑧0.25 mo