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肺炎链球菌耐药性及流行性剖析 　　【摘要】目的 了解遵义市第二人民医院2013年入院儿童分离的肺炎链球菌对抗菌药物的敏感性状况，并统计一年中肺炎链球菌感染的高发时间，为临床用药提供指导。方法 306株肺炎链球菌分离自本院2013年1月到2013年12月新生儿科及儿科所有痰培养标本，对疑似肺炎链球菌的细菌用Optochin筛选，用胆汁溶菌实验进行再鉴定，阳性菌株用k-b纸片法检测肺炎链球菌的药物敏感性，同时统计每月的小儿痰培养总数和检出的肺炎链球菌的阳性总数。 结果 共收集到4378例小儿痰培养标本，其中阳性菌株有306株，总阳性率为6.7%。306株肺炎链球菌中对红霉素的耐药率达100%（306/306），对甲氧苄啶的耐药率达91.2%（279/306），对克林霉素的耐药率达99.7%（305/306），对左旋氧氟沙星利奈唑胺、万古霉素、利福平的耐药率达（0%-0.3%）。高发时间段为3-5月和11-12月。 结论 本院儿童感染肺炎链球菌以冬春季发病率较高，分离的肺炎链球菌对红霉素、甲氧苄啶和克林霉素有较高的耐药性，应规范临床经验性治疗的用药。 　　【关键词】 肺炎链球菌 耐药性 流行性分析 　　【中图分类号】R446.5 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2015）03-0058-02 　　肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae）简称肺炎球菌（pneumococcus），在临床化脓性球菌中，肺炎链球菌的致病力仅次于金黄色葡萄球菌。肺炎链球菌主要引起大叶性肺炎以及气管炎、中耳炎、脑膜炎、胸膜炎、心内膜炎、败血症等疾病[1]。WHO 估计每年约有160万人死于肺炎链球菌感染，其中70 万～100 万为5 岁以下儿童，且多数生活在发展中国家[2]。近年来由于抗生素长期的过度使用，许多肺炎链球菌菌株能够同时耐受多种常用的抗生素，使得临床可应用的有效抗生素越来越少[3]。本次试验为通过本院新生儿科和儿科的所有痰培养分析在分离出的肺炎链球菌中其耐药的现状以及探讨其一年中的肺炎链球菌高发时间，为临床合理使用抗生素提供指导。现报告如下： 　　1 材料与方法 　　1.1研究对象 　　2013年1月到2013年12月我院新生儿科和儿科住院病人痰培养标本分离出306株肺炎链球菌 　　1.2试剂与仪器 　　试剂与仪器：杭州天和微生物试剂有限公司生产的Optochin试纸片及药敏纸片，药敏纸片有：左旋氧氟沙星、甲氧苄啶/磺胺甲?f唑、红霉素、克林霉素、青霉素、利奈唑胺、万古霉素、利福平。贝瑞特生物技术（郑州）有限责任公司生产的哥伦比亚血琼脂培养基及巧克力色琼脂培养基。上海齐欣科学仪器有限公司生产的HH.CP-TW二氧化碳培养箱。 　　1.3方法与步骤 　　1.3.1标本采集方法 均用吸痰器采取后在2小时内运送到实验室，立即进行接种。 　　1.3.2分离培养与鉴定 　　培养：将标本接种于哥伦比亚血琼脂培养基及巧克力色琼脂培养基上，放于二氧化碳培养箱中，37℃孵育18-24小时，观察菌落形态及涂片镜检。分离培养：取单个菌落分纯培养接种于哥伦比亚血琼脂培养基上，置于二氧化碳培养箱中孵育18-24小时。鉴定：几乎所有肺炎链球菌对Optochin敏感，而Optochin对其他链球菌则无抑制作用，用直径为6mm的Optochin纸片（5ug/片）贴于涂布有待测菌的平板上，35℃-37℃孵育过夜，抑菌圈直径大于14mm为敏感。同时做胆汁溶菌实验，用10%去氢胆酸盐滴于optochin敏感菌落上，35℃孵育15分钟，菌落消失或变平即为阳性，用这两个实验可以确定是肺炎链球菌[4]。 　　1.3.3药敏 用分纯的菌落做药敏，药敏采用k-b纸片扩散法。 　　1.3.4记录试验的结果。 　　1.3.5分析所得数据，做方法学的统计 。 　　2 结果 　　2.1 一年中收集到4378例痰培养标本，用optchin鉴定分离出阳性菌株306例，总阳性率为6.7%。其药敏结果见表1 　　表1 306例肺炎链球菌对7种药物的敏感率 　　Table 1 306 cases of Streptococcus pneumoniae to seven kinds of drug sensitivity rate 　　抗菌药敏感 耐药 中敏 例数百分比 例数 百分比 例数 百分比氧氟沙星 302 98.7 4 0.3 0 0甲氧苄啶 23 7.5 279 91.2 4 1.3红霉素 0 0 306 100 0 0克林霉素 0 0 305 99.7 1 0.3利奈唑胺 303 99.0 0 0 3 1.0万古霉素 306 1000 0 0 0利福平 306 100 0 0 0 02.2 2013年检出肺炎链球菌阳性率见