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胃癌患者外周血淋巴细胞免疫功能剖析 　　[摘要] 目的 分析胃癌患者免疫功能情况，并探讨患者不同临床分期（TNM）与免疫功能之间的关系。 方法 选择2011年1月～2012年1月胃癌患者62例（病例组）和同期健康成年人62例（对照组），采用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞亚群及NK细胞表达水平，并根据国际最新TNM分期标准，比较病例组与对照组、不同临床分期患者免疫功能差异。 结果 病例组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD16+CD56+水平均低于对照组，CD8+水平高于对照组，差异均有高度统计学意义（均P 0.01）；Ⅲ、Ⅳ期胃癌患者与Ⅰ、Ⅱ期患者比较，CD4+/CD8+、CD16+CD56+表达水平较低，而CD8+水平较高，差异均有高度统计学意义（均P 0.01）。 结论 胃癌患者免疫功能较正常人低，临床分期越后，免疫功能越低。检测胃癌患者淋巴细胞亚群水平可有效评价患者免疫功能状态，并对判断患者预后情况具有一定的指导意义。 　　[关键词] 胃癌；免疫功能；流式细胞术 　　[中图分类号] R735.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）02（a）-0030-03 　　胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一，最新资料表明，我国恶性肿瘤发病中，胃癌位于第二位，仅次于肺癌，胃癌死亡率位于恶性肿瘤死亡的第三位[1]。大部分胃癌患者确诊时已处于中晚期，其5年生存率低，为7%～34%，故对胃癌的治疗及预后研究是十分必要的。目前研究均表明，机体免疫功能的变化与肿瘤的发生、发展密切相关[2]。因此，本研究采用病例对照研究，应用流式细胞仪分别测定胃癌患者和健康人群中外周血淋巴细胞亚群及自然杀伤细胞（NK）的表达情况，分析胃癌患者免疫功能变化情况，并探讨不同临床病例分期与患者免疫功能之间的关系，为胃癌的临床治疗及判断预后提供科学依据。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　选择2011年1月～2012年1月四川省崇州市人民医院收治的门诊或住院胃癌患者62例为病例组，其中，男34例，女28例，年龄31～76岁，中位年龄56岁，所有患者均经病理确诊。选取同期健康体检者62例为对照组，其中，男30例，女32例，年龄28～72岁，中位年龄54岁。两组性别、年龄等一般情况比较，差异无统计学意义（P 0.05），具有可比性。 　　62例病例组患者中，按病理类型分类：腺癌45例，黏液腺癌6例，低、未分化癌4例，印戒细胞癌7例。根据国际最新TNM分期标准[3]对患者进行分期：Ⅰ期8例，Ⅱ期22例，Ⅲ期25例，Ⅳ期7例。见表1。 　　1.2 检测方法 　　病例组（未接受手术及放化疗之前）和对照组均于早晨抽取空腹静脉血2 mL，抗凝处理，立即送检。将样本置于流式试管内，分别加入20 μL荧光素标记的鼠抗人单克隆抗体（CD3、CD4、CD8、CD16+56+），混匀后室温避光保存30 min，随后加入红细胞裂解液，充分混匀后，经反复离心弃上清液，待红细胞完全溶解后用流式细胞仪检测。仪器及配套试剂均由美国Becton Dickson公司生产。检测前进行仪器校正并做好质控，保证检测的准确性。 　　1.3 统计学处理 　　采用统计软件SAS 9.2对实验数据进行分析，计量资料数据以均数±标准差（x±s）表示，两两比较采用t检验。计数资料以率表示，采用χ2检验。以P 0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 病例组与对照组淋巴细胞亚群表达水平的比较 　　病例组淋巴细胞亚群表达与对照组比较，病例组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD16+CD56+水平均低于对照组，CD8+水平高于对照组，差异均有高度统计学意义（均P 0.01）。见表2。 　　2.2病例组患者不同临床分期淋巴亚群表达水平的比较 　　由于样本量较少，分别将Ⅰ、Ⅱ期，Ⅲ、Ⅳ期合并为一组。与Ⅰ、Ⅱ期患者比较，Ⅲ、Ⅳ期患者CD4+/CD8+、CD16+CD56+表达水平较低，而CD8+水平有所升高，差异均有高度统计学意义（P 0.05）。 　　3 讨论 　　目前研究已证实，机体免疫功能与肿瘤的发生发展密切相关。免疫功能障碍是肿瘤发生的原因之一，而机体产生肿瘤后，会进一步对机体免疫功能造成影响，而由T淋巴细胞、NK细胞介导的细胞免疫在机体抗肿瘤方面起重要作用。 　　CD3+T细胞反应机体总的免疫功能情况，为CD4+和CD8+T细胞数之和。根据细胞表面标志，T淋巴细胞主要分为CD4+、CD8+两大类，其中CD4+称为辅助T细胞，CD8+称为细胞毒T细胞。CD4+T细胞抗肿瘤作用表现为：一是对NK细胞、巨噬细胞、细胞毒细胞等抗肿瘤作用有协调作用，二是通过自身分泌白细胞介素、干扰素及肿瘤坏死因子等实现抗肿瘤作用，三是少