大豆脂氧酶催化过程的关键性问题研究及其产品的合成与应用-应用化学专业论文.docx

摘要 摘要 +脂肪轼合酶 (LOX)为活性中心含有铁的金属脯，能专一催化氧化含有 cis ，cis-l ，4 戊 二烯不饱和铅构的脂肪族化合物，通过分子内加氧形成含有共辄双键的氢过氧化衍生 物。本文针对大豆 LOX 催化过程中的一些关键问题，例如外源金脱离子对其催化过程 的调控，外源 Cu2 与酶活性中心 Fe2+的青换，以及酶的热敏现象与其二级结构变化之间 的关系进行了研究，加深了对 LOX 催化行为的理解。此外开发了一条利用脱脂豆柏为 直接催化剂，在线(肉联酶的提取和固定化的高效合成氢过氧化物的工艺，并研究了合成 产物的性能及其进一步应用。 + 首先研究了外源金!再离子对大盟 LOX 的构象以及催化活性的影响。发现大豆 LOX 的 催化活性对外源金属离子及其浓度的响应各异，其作用关系可以用 IrvingWilliams序列 现论和Jahn-Teller放应来解释。并且利用新型指示剂对殷基偶氮安悴比林和对竣基苯基 荧光酬首次定量证明了外源 Cu2+与LOX活性中心的Fe2+发生了青换。 其次，为了深入分析 LOX 的热失活成时，研究了 LOX 的热失活动力学及其二级结 构在变温下的 CD 与 FT-IR 光谱变化。研究发现在 5065 0C 下， LOX 的热失活遵循一级 0反应动力学，活化能 Ea 值为 217 kJ.mor1 0 与原生态 LOX 相比，升高血度使 LOX 结构 中 ψ螺旋含量下降了约 3%，β折叠含量增加了约 5%。但LOX 的工级结构随加热时间 的变化并不遵循…级反应，而是保持相对稳定:说明其二级结构的变化不是导致 LOX 失活的直接尿阁。 进一步地，利用脱脂豆柏为直接催化剂，将 LOX 的提取、固定化和催化祸合于同 一过程中，分别对亚油酸，亚油酸乙酶和豆油的催化氧化进行了系统研究。对影响反应 的一些主要闲索分别进行了考察与优化，最后分别以 70%、55%和 61%的产率得到相 应的氮过氧化产物:远高于文献报道的亚油酸甘油脂的平衡产率 (15%) 。实验使用的脱 脂豆柏较粗 LOX 的催化效率高，且能多次循环使用。此外，研究发现超卢披介入可以 减少催化剂用最歪原来的 15% 并将反应时间缩短为原来的 1130 最后，研究了合成产物表团活性剂氢过氟化亚油酸饷 (LA-HPOD-Na) 和览基亚油酸 纳(LA-HOD-Na) 的表阳物化性能。 LA-HPODNa 对亚叩兰的漂除率最高达 98% ，漂白性 能较常用氧漂剂过棚酸制和过碳酸饷优越。由于来水基团注幕的存在， LA-HOD-Na 的 表面张力较亚油酸饷高，乳化性能和分散性能较好。 关键词:大显脂氧酶酶催化金属离子构象超声 Abstract Abstract Lipoxygenase (LOX) can catalyze the oxidation of polyunsaturated fatty acids with cis，cis斗，4-pentadiene to synthesize the corresponding hydroperoxides (HPOD) of conjugated (trαns，cis)-dienes. In this paper，some key issues in the catalysis of LOX and the synthesis of hydroperoxide product ，for example，the control of exogenous metal ions on the LOX +catalyzed reaction process，the substitution of Cu2 + with the iron in the active site of LOX，the connection between LOX activity and its conformation were studied. Besides，using soymeal as the catalyst，selecting linoleic acid，ethy门inoleate and soybean oil as the substrate，and ultrasonic irradiation was introduced into the lipoxygenation process，a green and efficient way to produce hydroperoxide product w础 given with satisfactory yield. 丁he main points were as follows: The effect o