番茄GRAS转录因子家族基因SlFSR的克隆及其功能研究-生物学专业论文.docxVIP

重庆大学 重庆大学硕士学位论文 英文摘要 PAGE PAGE IV downstream of RIN and ethylene signal. RNAi silence vector targeting SlFSR was conducted and transferred to Agrobacteriumtumefaciens strain LBA4404. Then the construct was used to transform tomato cotyledon explants. We obtained five transgenic tomato lines. The expression levels of SlFSR in B+4 fruits of 1-4 transgenic lines were down to 97.1%, 96.6%, 94.4% and 96.9%respectively. We also found that cell wall metabolism related genes of fruit, such as PG, CEL2, and TBG4 were inhibited in B+4 fruits of transgenic lines, accompanied with increased tomato fruit storability. However, the expression level of PE1 was up-regulated in B+4 fruits of transgenic lines. These results suggest that SlFSR might be involved in the regulation of fruit softening process during fruit ripening. Keywords：GRAS family, fruit softing, SlFSR, cell wall metabolism, digital expression profile. 重庆大学硕 重庆大学硕士学位论文 目 录 目 录 中文摘要I 英文摘要II 1 绪 论1 1.1 问题的提出及研究意义 1 1.2 国内外研究进展 2 1.2.1 果实成熟软化研究进展 2 1.2.2 植物 GRAS 家族研究进展 6 1.3 本文的研究目的及主要研究内容 11 1.3.1 本文的研究目的 11 1.3.2 本文的主要研究内容 11 2 番茄 GARS 家族基因的查找与生物信息学分析 13 2.1 引言 13 2.2 材料与方法 13 2.3 结果与分析 14 2.3.1 番茄 GRAS 家族基因的查找与电子表达谱分析 14 2.3.2 SlFSR 基因的生物信息学分析 19 2.4 讨论 21 3 SlFSR 基因的表达模式研究及沉默载体构建 22 3.1 引言 22 3.2 材料与方法 22 3.2.1 材料 22 3.2.2 试剂 22 3.2.3 主要仪器设备 22 3.2.4 实验方法 23 3.3 结果与分析 28 3.3.1 SlFSR 基因的表达模式研究 28 3.3.2 SlFSR 基因沉默载体构建 30 3.4 讨论 30 4 SlFSR 基因沉默转基因番茄的获得及功能分析 33 4.1 引言 33 4.2 材料与方法 33 4.2.1 材料 33 4.2.2 试剂 33 4.2.3 主要仪器设备 33 4.2.4 实验方法 34 4.3 结果与分析 39 4.3.1 SlFSR 基因沉默转基因番茄的获得 39 4.3.2 SlFSR 基因的功能分析 40 4.4 讨论 40 5 结论与展望 44 5.1 主要结论 44 5.2 后续工作展望 44 致 谢45 参考文献46 附 录56 重庆大学 重庆大学硕士学位论文 缩略词表 缩略词表 英文缩写 英文全称 中文全称 ABA abscisic acid 脱落酸 AC++ Solanum lycopersicum Mill. var. Ailsa 野生型番茄 Amp Craig ampicillin 氨苄青霉素 B B+4 CaMV 35S Carb ChIP CNR EFE EG ESTs Exp FSR GA IAA Kan LB MS NPT II Nr NOR PE PG PL Rif rin RNAi RT-PCR TBG TFs XTH ZT β-Gal Breaker 4 Day after Breaker cauliflower mosaic virus 35S promoter carbenicillin chromati