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簇毛麦基因组新的特异重复序列的分离、鉴定和应用生物物理学专业论文.docx

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簇毛麦基因组新的特异重复序列的分离、鉴定和应用生物物理学专业论文

独 创 性 声 明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究 工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致 谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果, 也不包含为获得电子科技大学或其它教育机构的学位或证书而使 用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已 在论文中作了明确的说明并表示谢意。 签名: 日期: 年 月 日 关于论文使用授权的说明 本学位论文作者完全了解电子科技大学有关保留、使用学位 论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印 件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权电子科技大学可以 将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采 用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 (保密的学位论文在解密后应遵守此规定) 签名: 导师签名: 日期: 年 月 日 摘要 摘 要 簇毛麦属(Dasypyrum ,又称 Haynaldia)在植物分类上属禾本科(Gramineae) 小麦族(Triticeae)的小麦亚族(Triticinae),是小麦的近缘属之一。具有抗白粉 病,抗叶锈病和秆锈,抗全蚀病,分蘖力强,小穗数多,耐旱耐寒,耐盐和蛋白质含量 高等许多栽培小麦所需要的有利性状,是小麦性状、品质改良的重要遗传资源。簇 毛麦属包括 2 个物种:二倍体簇毛麦 D. villosum (L.) Candargy 和四倍体多年 生簇毛麦 D. breviaristatum (Lindb. F.) Frederiksen。目前,对二倍体簇毛 麦的研究和利用相对较多,已经创制了几套硬粒小麦或普通小麦-二倍体簇毛麦异 附加系与代换系,进而把来自染色体 6V 上的抗白粉病基因 Pm21 和染色体 4V 上的 抗眼斑病基因 PchDv 以及和抗小麦梭条花叶病基因 Wss1 导入到小麦中。最近我们 在利用四川农业大学蒋华仁等率先在国内外合成的多年生簇毛麦-小麦的双二倍 体的基础上,开展了将多年生簇毛麦这一珍贵物种的优异基因导入小麦的研究工 作,鉴定出一批导入多年生簇毛麦有利性状的优异资源并选育了一批具有多年生 簇毛麦染色质的中间材料,建立了多个能够检测簇毛麦染色质的 RAPD、SSR 和 SCAR 分子标记,丰富了簇毛麦基因资源在小麦中的应用的实践。 随着远缘杂交将小麦族植物优异基因导入小麦的染色体工程育种的进行,有 效地检测与跟踪外源染色质显得十分重要。建立在 DNA 序列基础上的分子标记 RAPD 和 SCAR 技术以其准确、快捷、不受植物生长时期的限制、成本低等优点被广泛的 运用,特别在建立染色体特异性标记、基因组特异性标记和物种特异性标记上具 有其他分子标记不可比拟的优点。本论文的研究结果如下: 1、利用 RAPD 技术筛选出的高度重复序列(OPM2937)设计特异 PCR 引物对含 簇毛麦染色质的材料以及对照组多个小麦进行分析鉴定。结果显示,所有含簇毛 麦染色质的材料均能扩增出目标片段,而对照组小麦均未扩增出目标片段。对一 套 中 国 春 - 簇 毛 麦 附 加 系 ( Chinese Spring-D. villosum additions, CSDA1V-CSDA7V)的扩增结果表明 CSDA1V-CSDA7V 均能扩增出目标片段,表明 OPM2937 存在于簇毛麦全套染色体上。簇毛麦后代 Y93-1-31 等都能够扩增出约目 标条带,表明该特异引物不仅可以用于鉴定簇毛麦,而且可以鉴定簇毛麦的后代。 该标记可以作为多年生簇毛麦基因组的特异分子标记检测导入到小麦背景中的多 年生簇毛麦染色质。 I 摘要 2、以中国春基因组总 DNA 为封阻,以 OPM2937 为探针对小麦-多年生簇毛麦双 二倍体(AABBVbVb,2n=42)中期染色体细胞进行原位杂交,结果表明 14 条多年生 簇毛麦染色体具有黄色杂交信号,该信号分布于多年生簇毛麦染色体除端部和着 丝粒区以外的区域,进一步证实了 OPM2937 为簇毛麦基因组的特异重复序列序列。 关键词:簇毛麦, 基因组特异性 DNA 片段, DNA 序列标记, 原位杂交 II Abstract Abstract Belonging to Triticinae of Triticeae, Dasypyrum contains a large number of useful target genes for resistance to extensive powdery mildew and stripe rusts. It has strong ability of tiller, more spicules, bears drought, cold, slat and has high quan

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