栉孔扇贝wnt4基因cDNA克隆及表达分析.PDF

栉孔扇贝 wnt4 基因 cDNA 克隆及表达分析 删除的内容:  李海龙，刘建国，刘晓玲，张志峰中国海洋大学 海洋生物遗传育种教育部重点实验室， 山东 青岛 266003 摘 要 ：由栉孔扇贝（Chlamys farreri）转录组数据库获得wnt4 基因的一段表达序列标签（EST ）序列， 删除的内容: 栉孔扇贝 利用 SMART-RACE 技术克隆了 wnt4 基因 cDNA 全长序列，该序列长 1239 bp，其中开放阅读框为 1068 bp， （Chlamys farreri ） 可以编码 355 个氨基酸，推导的氨基酸序列含有 WNT 家族特有序列，且与沙蚕（Platynereis dumerilii ）、 删除的内容: 多个物种的 海胆（Heliocidaris erythrogramma ）、人（Homo sapiens ）等物种 WNT4 同源性都在 60% 以上。半定量 RT-PCR 带格式的: 字体: 小五 结果显示，除肾脏外，wnt4 基因在栉孔扇贝的精巢，卵巢，闭壳肌，肝胰腺，鳃，外套膜组织中均有表达， 但表达量较低。定量 RT-PCR 结果表明：wnt4 基因在成熟期的精卵巢中表达量最高，增殖期和休止期表达 量次之，生长期表达量最低；整个生殖周期中精巢表达量高于卵巢。该基因在栉孔扇贝多个组织中的表达 特性，暗示其参与了多样的生物学过程；在性腺中的表达特征表明其可能参与两性性腺的发育并在生殖细 胞成熟过程中发挥作用。 关键词：栉孔扇贝；wnt4 基因；克隆；表达  WNT （Wingless-type MMTV integration site family ）作为一种重要的信号分子可以激活多 种信号通路，在动物的早期发育和各种细胞的生命活动中发挥着重要的作用[1-4] 。在小鼠 、线虫（Caenorhabditis elegans）和果蝇（Drosophila melanogaster ）中， （Mus musculus ） [5] wnt 基因的突变都表现出了异常的表型 ，此外，WNT 异常的表达或激活往往与人类肿瘤发 生相关[6] 。  WNT4 （Wingless-type MMTV integration site family ，member 4 ） 是 WNT 家族成员之一， [7] 其蛋白富含有保守的半胱氨酸残基，都有一段信号肽序列和 N-连接的糖基化位点 。迄今 、小鼠、非洲爪蟾（Xenopus laevis ）、斑马鱼（Danio 该基因的 cDNA 已在人 （Homo sapiens ） rerio ）、海胆（Heliocidaris erythrogramma ）、果蝇、沙蚕（Platynereis dumerilii ）、乌贼（Euprymna scolopes ）、日本血吸虫（Schi