丹参酮IIA预处理诱导内源性神经保护及对HSP70和TNF-α mRNA表达的影响-中西医结合临床神经专业论文.docx

成都中医药大学硕士学位论文 成都中医药大学硕士学位论文 PAGE PAGE 1 摘 要 目 的 观察丹参酮预处理对局灶性脑缺血模型大鼠脑梗死体积，尼氏体的 变化，HSP70 及 TNF-αmRNA 表达水平的影响。探讨丹参酮诱导机体内源性神经 保护及其机制。 方 法 利用二次线栓法建立局灶性 SD 大鼠脑缺血及缺血耐受的动物模型。 120 只大鼠随机分为 6 组①MCAO 组：缺血组（NS+MCAO）②IP 组：预缺血+缺血 组（IPC+MCAO）③DY 组：丹参酮＋缺血组（DS＋MCAO）④DZ 组：缺血＋丹参酮 组（MCAO＋DS）MCAO 后给药⑤SS 组：假手术组（SS+SS）⑥KB 组。IP 组给予预 缺血 10min 处理；MCAO 组以 NS 腹腔注射；DY 组给予丹参酮腹腔注射；以上各组 三天后造成 2hMCA0，再灌注 22 小时处死；DZ 组造成 2hMCA0，待麻醉清醒后， 给以腹腔注射丹参酮，三天后处死；SS 组给以两次暴露分离颈部血管，两次手 术间隔 3 天；正常组不处理，每组 20 只。对 SD 大鼠进行神经功能缺损评分，脑 梗死体积的测定、光镜下观察脑组织病理改变，运用 Nissl 染色、免疫组织化学 染色及 RT-PCR 和图像分析比较各组尼氏小体、HSP70 及 TNF-αmRNA 的表达变化。 结 果 ①IP 组、DY 组和 DZ 组神经功能缺损评分、脑梗死体积均较 MCAO 组 减少，其中 IP 组和 DZ 组减轻最明显，DY 组次之，组间有统计学意义（P0.05）； 尼氏体情况（IOD 值）：IP 组、DY 组和 DZ 组较 MCAO 组增多，其中 IP 组和 DZ 组 增多最明显，DY 组次之，组间有统计学差异（P0.05）；病理变化：MCAO 组损伤 最严重，DY 组次之，IP 组和 DZ 最轻；SS 组和 KB 组基本没有变化。②HSP70 在 IP 组、DY 组、DZ 组和 MCAO 组均有不同程度的表达，其中 IP 组和 DZ 组最明显， DY 组次之，与 MCAO 组相有统计意义（P0.05），SS 组和 KB 组几乎不表达。③TNF- αmRNA 的表达:各缺血组 TNF-αmRNA 均有不同程度的表达，与 MCAO 组比较，IP 组、DY 组、DZ 组能明显下调 TNF-αmRNA 的表达，差异显著（P0.05），IP 组和 DZ 组较 DY 组下调更明显。 结 论 ①丹参酮预处理能够诱导内源性神经保护，对随后发生的严重的致 死性的缺血起到保护作用。②上调 HSP70 的表达，下调炎性因子 TNF-αmRNA 的 表达可能是诱导内源性神经保护的机理之一。 关键词 缺血预处理（IP） 内源性神经保护（NEP） 大脑中动脉栓塞（MCAO） 热休克蛋白-70（HSP-70） 肿瘤坏死因子-α（TNF-α） 丹参酮 Abstract Objective To investigate the influence of Tanshinone precondition -ing on the Infarct volume,the quantity of nissl body,the expression of heat shock protein 70 and TNF- α mRNA.To approach the Tanshinone’s endogenous neuroprotectant effect and its mechanisms. Methods In this study,Ischemic preconditioning (IP) was induced by intraluminal filament middle cerebral artery for 10 min.Middle cerebral artery occlusion (MCAO) was induced by intraluminal filament for 2h after IP 72h.120SD rats were included and randomly divided into 6 groups:MCAO group received 2h MCAO followed by 22h reperfusion before 3 days NS administration through peritoneal injection,IP group received 2h MCAO followed by 22h reperfusion with IP,DY group received 2h MCAO followed by 22h reperfusion before 3 day