结直肠腺癌组织中c―JUN氨基末端激酶、E―选择素、血管内皮生长因子―D蛋白表达的临床意义.docVIP

结直肠腺癌组织中c一JUN氨基末端激酶、 E—选择素、血管内皮生长因子一D蛋白表迖的临床意义 ［ ］目的探讨c-JUN氨基末端激酶（c-JUN）、 E-选择素（E-selectin）、血管内皮生长因子HD蛋白（VEGF-D） 蛋白在结直肠腺癌发展和转移中的作用。方法收集2012 年8月?2014年9月于北京市海淀医院手术切除的正常大肠 黏膜组织标本（20例）和结直肠腺癌标本（50例），应用免 疫组化法检测标本中c-JUN、E-selectin、VEGF-D蛋白的表 达，观察c-JUN、E-selectin、VEGF-D与临床病理的联系及 c-JUN与E-selectin、VEGF-D的相关性。结果①结直肠癌 组织中，c-JUN、E-se 1 ectin、VEGF-D蛋白表迗的阳性率（84%、 78%、92%）显著高于正常大肠黏膜组织（5%、10%、10%）, 差异有高度统计学意义（P 1资料与方法 1.1 一般资料 收集2012年8月?2014年9月于北京市海淀医院普通 外科手术切除的50例结直肠癌组织和20例正常大肠组织 （非结直肠癌）。结直肠癌患者50例中，男37例，女13例; 年龄37?78岁；结直肠癌Dukes分期：A期5例，B期17 例，C期20例，D期8例；有淋巴结转移者35例，无淋巴 结转移者15例；术前均未接受放、化疗及免疫治疗，术后 均经病理检查证实。非结直肠癌患者20例中，男14例，女 6例，年龄30?72岁。本研究经医院伦理委员会审查通过， 患者均签署知情同意书。 1.2 c-JUN、E-selectin、VEGF-D 蛋白检测 试剂盒购自武汉博士德生物技术公司，所有组织均经 10%甲醛固定，石蜡包埋，制成4 um厚病理切片，贴附于 多聚赖氨酸的载坡片上。采用免疫组化SP法检测，一抗均 为鼠抗人单克隆抗体，DAB显色，全部操作过程均按试剂说 明书进行，用已知阳性切片作为阳性对照，磷酸盐缓冲液 (PBS)替代一抗作为阴性对照。 1.3结果判定标准[4] 采用双人双盲法判定，免疫组化阳性初步判定标准为细 胞核或细胞核与细胞质中同时出现棕黄色颗粒，①阳性细胞 百分比评定标准：随机选取4个高倍镜视野，每个视野计数 100个细胞，计算阳性细胞的百分比，0分为阳性细胞数百 分比为0，1分为阳性细胞数彡10%，2分为10%75%。②染色 强度评分标准：0分为无显色，1分为淡黄色，2分为棕黄色， 3分为棕褐色。免疫组化最终结果判定标准：阳性细胞百分 比与染色强度评分的乘积本研究对结直肠癌组织中 比与染色强度评分的乘积 本研究对结直肠癌组织中 VEGF-D和E-selectin的表达进行检测，结果提示两者表迗 的共同增加是一个明显的特征性改变，VEGF-D可以促进血管 及淋巴管不断增生，瘤体血运丰富，肿瘤细胞生长活跃，但 肿瘤细胞仅在局部生长而不能移动，则不会发生转移。恶性 肿瘤细胞的转移必然需要其他免疫因子的帮助，E-select in 可能起到了关键作用，其在肿瘤组织内部大量表达，推测可 能促进了肿瘤细胞与血管内皮细胞或淋巴管内皮细胞的黏 附，一旦突破了基底膜，肿瘤细胞便会发生转移。两者之间 还可能存在协同促进作用，但具体机制还需要更加深入的研 究。 综上所述，VEGF-D和E-selectin与结直肠癌的发展与 转移有关，c-JUN可能调控VEGF-D和E-selectin的表达。 但由于本研究结果还有很大的局限性，更确切的机制还需要 进一步的研究。 [ ] Darting TE， Zhong M, Vo BH， et al. Vascular endothelial growth factor A, secreted in response to transforming growth factor-betal under hypoxic conditions, induces autocrine effects on migration of prostate cancer cells [J]. Asian J Androl, 2012， 14 (5)： 745-751. 邹永分t，王智刚，张克新，等.肺癌患者血清畸胎 瘤衍生生长因子、VEGF和TK1水平及临床意义[J].临床检验 杂志，2014，32 (6)： 414-417. 鲁建军，马俊，缪蓉，等.血管内皮生长因子D在 食管鳞癌组织中的表达及其临床意义[J].中华胃肠外科杂 志，2013，16 (12)： 1191-1194. 王洪远，费洪钧，梁雅静.食管癌组织中上皮钙黏 素、⑶44v6和血管内皮生长因子C表达与淋巴结转移的关系 [JL 肿瘤研究与临床，2010, 11 (22)： 755-757. 周红凤，付冬伟，胡晓薇，等.胃癌组织中的MUC1 和