李善刚《学实验动物学》03 第三章 微生物与寄生虫质量控制.pptVIP

方法要求：1.国内外通用,比较成熟,便于交流。2.可操作性强，检测结果易判断，检测率较高。3.易实现标准化和规范化，便于推广。 国家推荐性标准 《实验动物微生物学检测方法1～4》 GB/T14926.1～14926.64－2001 《实验动物寄生虫学检测方法》GB/T18448.1～18448.10－2001 1. 实验动物病毒学检测方法 目前我国对实验动物病毒学检测通常使用血清学方法，包括： 酶联免疫吸附试验（ ELISA ） 免疫荧光试验（ IFA） 免疫酶染色试验（ IEA ） 血球凝集（HA）和血球凝集抑制（HI）试验 2. 实验动物细菌学检测方法 通常采用细菌分离和培养方法。根据培养基上菌落特征，将分离到的可疑菌落作生化鉴定。 检测人员的实际工作经验，直接影响到其对检测结果的判断准确性。对部分细菌，如沙门氏菌，支原体等已开展血清学方法检测。泰泽氏病原体不能在人工培养基上生长，目前还以病变组织压片镜检进行检测，并结合病理学检查结果作出判断。 3. 实验动物寄生虫学检测方法 通常在光学显微镜下查找寄生虫的虫体、虫卵或孢子。对人兽共患的弓形虫，则采用各种血清学的方法进行检测。 三.检测规则 1.检测频率 拟以间隔2?3个月为宜。在实验动物的国家标准中，即规定：每3个月至少检测1次。 病原体刚侵入实验动物群体时,较易分离到病原体;而当流行趋于平静可能分离不到病原体,但特异性抗体的检出率上升。通常在2?3个月内，抗体检出率不会下降太大。随着时间的推移，某些个体的抗体效价水平会下降，以及新生的非感染动物增加，使抗体阳性动物的检出大量减少。 2.取样数量 通常对于动物群体中感染率高的病原体，只需少量采样就能检出；而当感染动物比例低时，若不增加取样数量，就可能漏检。 因此，可根据实验动物群体中病原体的感染率决定取样数量。如病原体感染率为1％，要检出感染动物至少应取样100只。 病原体检测取样数量 感染率 % 检测可信度 99％ 95％ 90％ 90 2 2 1 80 3 2 2 70 4 3 2 60 5 4 3 50 7 5 4 40 9 6 5 30 13 9 7 20 21 14 11 10 44 29 22 达标的实验动物须排除的病原体感染率应为“0”,取样数量须达60-90%以上，其检测结果的可信度方可达到95-99%。而啮齿类实验动物采样，通常都牺牲被检测动物; ?且实验动物寄生虫学质量检测通常与微生物学质量检测同时进行，而病原体的感染率不可能相同。因此,在标准中采用的取样数量和取样方法，将适当参考实验动物群体大小，兼顾绝大多数病原体的感染率，以决定取样数量;并规定取样点。  实验动物不同生产群体取样数 群体规模，只 取样数量，只 100 5 100～500 10 500 20 每只隔离器检测2只 活体取样 对实验动物的活体取样未作规定。 无特殊要求时，对鸡、兔、犬和猴的活体取样，可在生产繁殖设施内进行。 第十章生物安全 一、生物安全的定义 针对生物医学专业或现代生物技术的开发和应用，造成对人体健康和生态环境的潜在威胁，而应采取的一系列有效预防和控制的措施。 广义的生物安全包括 (1)人类的健康与安全; (2)人类赖以生存的农业生物的安全; (3)与人类生存息息相关的生物多样性，即环境生物安全。 生物危害 主要来自： 1.野生动物所感染的各种微生物 2.不合格实验动物所携带的各种人兽共患病的病原体 野生动物所感染的各种微生物 生物危害 实验人员或饲养人员 环境的污染 生态环境、生物多样性存在着潜在着威胁 不合格实验动物所携带的各种人兽共患病的病原体 忽视生物安全的行为 1.午餐与标本同存于实验室冰箱内； 2.在实验室内抽烟、进食、喝饮料； 3.不戴手套清洗未消毒的玻璃器皿； 4.穿着实验服去食堂午餐、到会场开会； 5.随意使用来源不清，质量不明的动物进行实验； 6.生物垃圾与生活垃圾混淆一起处理； 7.坚持使用传统的超净工作台，不添置生物安全柜； 超净工作台 Ⅰ级生物安全柜 Ⅱ级生物安全柜 超净台与生物安全柜 WHO对感染性微生物分类标准 等级 危险度 传播结果 Ⅰ 对人和城乡社会的危险度低。 不可能引起人类疾病，或引起兽医学上重要动物疾病的微生物。 Ⅱ 对人有中等危险度，对城乡社会有轻微危险性。 对人或动物虽有致病性，但对实验