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干预Hedgehog信号通路对体外培养人脑胶质瘤肿瘤干细胞影响的实验研究-临床医学(神经外科)专业论文
万方数据
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汕头大学
汕头大学研究生毕业论文
I
干预 Hedgehog 信号通路对体外培养人脑胶质瘤肿瘤干细
胞影响的实验研究
中文摘要
目的:体外无血清培养原代人脑胶质瘤肿瘤干细胞及其特性的鉴定;检测Hedgehog 信号通路在胶质瘤肿瘤干细胞中的表达以及Hedgehog信号通路抑制剂环靶明对体外原 代培养的人脑胶质瘤肿瘤干细胞生长及增殖影响。
方法:将我院神经外科手术切除的胶质母细胞瘤标本分离、培养出胶质瘤肿瘤干 细胞。行免疫组化及荧光染色鉴定胶质瘤肿瘤干细胞及其肿瘤干细胞特性和Hedgehog 信号通路在其的表达。使用CCK-8测定Hedgehog信号通路抑制剂环靶明对胶质瘤干细胞 增殖-毒性的影响。
结果:
1. 使用无血清培养技术培养的悬浮状的细胞团表达CD133和Nestin标记物,其具 有无限增值、自我更新能力,10%胎牛血清培养基诱导可分化为胶质瘤细胞。
2. Hedgehog信号通路关键蛋白Sonic Hedgehog和Smo在胶质瘤肿瘤干细胞中表达。
3. CCK-8结果显示:分别使用Hedgehog信号通路抑制剂0.5,1,5umol/L环靶明对胶 质瘤干细胞的生长抑制率依次为(21.93±6.57)%,(32.03±9.13)%,
(47.78±16.09)%,(P0.01),表明环靶明可显著抑制胶质瘤肿瘤干细胞的 生长增殖,且与浓度呈依赖性;作用时间为4,12,24,36,48,60h环靶明对干细 胞的生长抑制率依次为(25.89±7.11)%,(28.00±10.00)%,(32.98±16.87)%,
(35.83±17.44)%,(41.31±16.12)%,(41.58±19.72)%,(P0.01),
表明环靶明对胶质瘤肿瘤干细胞的增殖生长与时间呈相关性。
结论:Hedeghog信号通路的特异性抑制剂环靶明能够显著抑制体外培养的胶质瘤 肿瘤干细胞增殖。
关键词 : 人 脑 胶 质 瘤 肿瘤 干细胞 ; Hedgehog 信号通路 ; Sonic Hedgehog ; Smoothened;环靶明
汕头大学
汕头大学研究生毕业论文
II
In vitro experimental study on the intervention of the Hedgehog signaling pathway in human glioma stem cells
Abstract
Purpose: To culture the primary glioma cancer stem cells in vitro with serum free medium and identify the characteristics; To investigate the expression of Hedgehog signaling pathway in glioma and the effects of cyclopamine, the inhibitor of Hedgehog signaling pathway,on the glioma stem cells’ growth and proliferation.
Methods: The glioma stem cells were isolated and cultured from the glioblastoma sample removed from neurosurgery in our hospital. Immunohistochemistry and fluorescence stain were used to identify the stem cells and detect the expression of Hedgehog signaling pathway genes. The effects of cyclopamine on the growth
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