生理学呼调节实验.pptVIP

家兔呼吸运动的调节 实验目的 掌握 家兔耳缘静脉注射法 家兔颈部手术操作、神经血管分离、气管插管技术 记录家兔呼吸曲线 观察 增加无效腔、气道阻力、肺牵张反射、开放性气胸等因素对呼吸运动的影响 迷走神经对呼吸运动的调节 了解 各种因素影响呼吸运动的机制 实验原理 人体及高等动物的呼吸运动能持续有节律的进行，是由于体内调节机制的存在。正常节律性呼吸运动是在呼吸中枢神经系统参与下，通过多种传入冲动的作用，反射性调节呼吸的频率和深度来完成的。 呼吸运动受神经以及血液中O2，CO2，[H+]等物质浓度调节。 肺的牵张反射通过迷走神经传导调节信号，通过这个反射弧来参与呼吸节律的调节。 实验材料 1、动 物：家兔 2、器 械：动物手术器材（手术刀、手术剪、止血钳、玻璃分针, 丝线，注射器，兔台），气管插管，体重秤，张力换能器，生理信号采集系统，医用橡皮管，纱布，20 ml 注射器，玻璃分针。 3、药品和试剂：20%氨基甲酸乙酯，0.9%生理盐水，医用酒精。 1. 称重、麻 醉 一只手轻抓住兔子颈部皮肤，另一只托住兔子尾部，将兔子自笼中取出称重； 称重后使用20%氨基甲酸乙酯麻醉 (给药量：5 ml/kg WT， 耳缘静脉注射) 。 实验方法 2. 家兔固定和剪毛 家兔麻醉后，使其腹部朝上仰卧于兔台上，用线固定四肢和头部；用金冠剪刀贴在皮肤表面剪除手术部位的毛发。 3. 颈部手术 颈部正中切口—分离软组织—暴露气管—钝性分离气管，底下穿棉线备用—气管倒T形切口，插入Y形气管插管，棉线固定； 钝性分离气管双侧迷走神经—各自穿线备用（粗—迷走神经，中—交感神经，细— 减压神经）。 图 1 家兔气管插管过程示意图 家兔气管插管过程注意事项 插管的手术切口可以在气管软骨环间，也可以在软骨环上。切口若在软骨环间，容易做切口，但易出血；切口若在软骨环上，出血较少，但切口难度较大； 插管时如果发现气管内有血，一定要先将血液清除； 插管的深度不可过浅，至少要插入3个软骨环以上； 结扎棉线一定要结扎在软骨环之间，这样插管结扎得比较牢固。为了防止插管滑脱，一般还要将棉线绕过插管的侧管再结扎一次。 4. 装置连接 用金属钩钩住家兔胸部部皮肤，并系线与张力传感器的应变梁相连，张力传感器与生理信号采集器的输入通道相连； 打开PC-lab 软件，将通道设置为“呼吸”，点击采样，收集家兔呼吸运动曲线。 5. 实验观察 记录平静呼吸的运动曲线，识别呼气和吸气各自对应的曲线方向，计算呼吸频率并测量强度； 增加无效腔对呼吸运动的影响：分别将两根长约50 cm和5cm、内径1 cm的橡皮管连于气管插管的侧管上，然后用止血钳夹闭短橡皮管一侧，以增加无效腔。观察并记录家兔的运动呼吸曲线，计算呼吸频率并测量强度，分析该因素引起呼吸运动变化的机制； 气道阻力对呼吸运动的影响：待呼吸运动恢复正常后，将气管插管的两个侧管同时夹闭数秒。观察并记录家兔的运动呼吸曲线，计算呼吸频率并测量强度，分析该因素引起呼吸运动变化的机制； 肺牵张反射对呼吸运动的影响：待呼吸运动平稳后，夹闭气管插管的一侧管，用20 ml 注射器吸入20 ml 空气，在吸气末期通过另一侧管徐徐向肺内注入，观察并记录家兔的运动呼吸曲线，计算呼吸频率并测量及强度。实验后立即打开夹闭的侧管，使呼吸恢复正常。同法，于呼气末期用注射器抽取肺内气体，观察并记录家兔的运动呼吸曲线，计算呼吸频率并测量强度，分析该因素引起呼吸运动变化的机制（注气与抽气的时间仅限于三个呼吸节律的时间，然后立即打开夹闭的侧管）； 用线提起一侧迷走神经，接通刺激通路，使用露丝电极刺激迷走神经，观察并记录家兔的运动呼吸曲线，计算呼吸频率并测量强度，分析该因素引起呼吸运动变化的机制； 阻断迷走神经传导对呼吸运动的影响：待呼吸运动恢复正常后，同时结扎双侧迷走神经，观察并记录家兔的运动呼吸曲线，计算呼吸频率并测量强度，分析该因素引起呼吸运动变化的机制；重复④的实验内容，观察并记录家兔的运动呼吸曲线，计算呼吸频率并测量及强度，分析该因素引起呼吸运动变化的机制。 剪断双侧迷走神经，分别刺激中枢端（近头端）和外周端（远头端），观察并记录家兔的运动呼吸曲线，计算呼吸频率并测量强度，分析该因素引起呼吸运动变化的机制； 剪开并剪断右侧肋骨，造成人工开放性气胸，观察并记录家兔的运动呼吸曲线，计算呼吸频率并测量及强度，分析该因素引起呼吸运动变化的机制。 观察过程中的注意事项 用生理盐水湿润过的纱布盖住颈部手术部位； 连接张力传感器时确定家兔以完全麻醉，否则家兔的剧烈挣扎易损坏张力传感器； 每一项实验前，要待家兔已经恢复正常呼吸后才能开始，并且描记一段正常的呼吸曲线作为对照。每项实验观察时间不宜过长，出现效应后应立即去掉刺激因素； 电刺激迷走神经之前，要