紫外吸收法和Brdford法检测蛋白质浓度.pptVIP

 紫外吸收法和Bradford法 检测蛋白质浓度 一、紫外吸收法 1、原理： 蛋白质分子中含有共轭双键，在280nm处有最大吸收值，其吸光度与蛋白浓度成正比。以标准蛋白作参比即可求得未知蛋白浓度。 2、器材与试剂（1）、器材 A.紫外分光光度计 B.坐标纸 C.恒温水浴 D.微量加样器 E.移液管 F.试管与试管架 3、操作取3支试管按下表操作：  空白 标准 测定 标准蛋白 （1 mg/ml） 0 1.0 0 待测样品1 （ml） 0 0 1.0  生理盐水 (ml) 4.0 3.0 3.0 　　 轻轻混匀放置5分钟，在２８０nm处以空白调零，测定各管光密度，计算蛋白含量．  计算公式： 测定O.D/标准O.D X 标准浓度X稀释倍数 =待测样品蛋白浓度（mg/ml