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南 瓜 育 种 技 术 Techniques of Pumpkin Breeding 汇报提纲 第一部分 前言 第二部分 研究方法 第三部分 存在问题 第四部分 育种方向 第一部分 前言 第二部分 研究方法 传统育种 常规杂交 远缘杂交 辐射育种 分子育种 分子标记 概念：指能反映生物个体（种群）间基因组中某种差异的特异性DNA片段，是DNA水平上遗传多态性的直接反映，多以电泳谱带的形式表现个体间的DNA差异。 类型：第一代，以southern杂交为核心的标记技术RFLP；第二代，基于PCR的标记技术RAPD、ISSR、SSR、STS等和基于PCR与酶切相结合的标记技术AFLP、CAPS等；第三代，基于测序的DNA分子标记SNP、EST、InDel等。 优点：直接反应植物基因组DNA间的差异，不受环境、季节等限制，而且具有数量多、多态性高的优势。 应用：南瓜遗传多样性的分析；育种目标质量性状和数量性状的筛选；品种纯度鉴定。 转基因 目前，南瓜属植物的转基因主要还是利用根癌农杆菌介导的叶 盘转化法, 在西葫芦上应用成功；采用基因枪方法也成功地获得了 转化的南瓜愈伤组织；采用发根农杆菌转化西葫芦也获得了成功, 而且不论活体植株上的子叶和茎, 还是离体培养的子叶, 都能很好 地产生发根, 没有显著差异。 细胞工程 单倍体育种 单倍体的每种基因都只有1个,是研究基因性质及其作用的良好材料。 单倍体可直接表达隐性基因的性状,更适于在细胞水平筛选突变体, 进行植物基因克隆筛选。 单倍体材料可查明其原始亲本的染色体组构成, 用于物种之间亲缘关系和物种进化的研究。 由单倍体加倍获得的双单倍体(DH)即为纯系，可直接用于育种, 极大地缩短育种周期 DH群体也是构建连锁图的优良群体。 离体雄核发育 离体雌核发育 对未授粉的子房或胚珠进行离体培养 活体雌核发育 外源正常花粉授粉诱导 通过辐射花粉授粉诱导 据报道，通过离体雄核发育途径生产单倍体难度较大。Metwally等（1998） 才成功地得到了10棵单倍体植株，并对培养基进行了筛选，发现单核中期和单 核晚期的南瓜小孢子接种在MS+15%的蔗糖+5mg/L 2,4-D上培养的效果最好, 每 块愈伤组织植株再生频率可达19.2%。外源正常花粉授粉诱导南瓜雌核发育获得 单倍体发生频率低且不稳定。未授粉子房(胚珠)培养和辐射花粉授粉诱导这两 种途径创制单倍体的效果较好。 原生质体融合 第三部分 存在问题 原生质体融合在南瓜上的应用 郭德张等（2004）采用电融合技术对黄瓜和黑籽南瓜的子叶原生质体进行了融合，并对电场条件进行了优化，得到了融合细胞的愈伤组织，但没能得到再生植株，估计与材料的基因，培养基的配方，取材的时间、部位有关。 第四部分 育种方向 中国南瓜 中国南瓜的最大特征是叶脉分叉处有银白色不规则斑纹。常 见的类型有密本南瓜和磨盘南瓜。 印度南瓜 又称板栗南瓜，西洋南瓜，是南瓜属中叶片无白斑，果柄圆形 的一个栽培种。 美洲南瓜 又名西葫芦，是南瓜属中叶片白斑较少，果柄五棱形的一个栽培种。 * 福建省农业科学院蔬菜研究中心学术交流 科研小组：十字花科 汇 报 人：王彬 福建省农科院作物研究所蔬菜研究中心 2014年12月10日 南瓜育种 前言 第一部分 南瓜育种 前言 第一部分 南瓜属（Cucurbita spp）有3个主要栽培种，分别是中国南瓜（C.moschato.Duch）、印度南瓜（C.maxima Duch）、美洲南瓜（C.PePo.L.）。 南瓜属植物起源于美洲大陆，经过我国人民多年的栽培，形成了 具有当地特色的多个品系。据统计，国家种质资源库（1995）保 存的中国南瓜材料有1064份，印度南瓜材料有357 份，西葫芦材料有389份。 Pumpkin 南瓜育种 研究方法 第二部分 南瓜育种 研究方法 第二部分 传统育种 分子育种 细胞工程 远缘杂交 辐射育种 分子标记 单倍体育种 转基因 常规杂交 原生质体融合 南瓜育种 研究方法 第二部分 南瓜育种 研究方法 第二部分 概念：对于一、二年生的有性繁殖植物来说，系通过人工杂交，把分散于不同亲本上的优良性状组合到杂种中，并对其后代进行多代选育，获得基因型纯合或接近纯合的新品种的育种途径。 从市场收集不同的南瓜种质资源 南瓜资源的栽培与多代自交纯化 纯合的父、母本 组合配置 创制新品种 雄 雌 单性花，雌雄异花同株 南瓜育种 研究方法 第二部分 概念：通常指分类学上不同种、属以上类间的杂交，又被称为分类学杂交。 2010 张富仙等认为美洲南瓜与印度南瓜进行种间杂交, 美洲南瓜只适合作母本、印度南瓜