2016年SRP结题答辩.pptVIP

2016年SRP项目申请答辩 姓名：宋宗强 何玲 张静 张令虹 胡娟娟 维药牛舌草对心肌缺血再灌注损伤保护作用研究 导师：李晓娟 研究背景 研究目的 研究方法 研究结果 结 论 讨 论 致 谢 目前心血管疾病已成为世界范围内的一个“现代流行病”， 其发病和死亡率逐年升高。在我国居民的死亡谱中，心血管疾病已经成为仅次于恶性肿瘤的第二号杀手。 牛舌草 (Anchusa italica Retz.) 为紫草科植物，维吾尔医药中将意大利牛舌草的地上部分入药称牛舌草，维药名高孜万，全草经预试有皂苷，黄酮类，氨基酸，挥发油，黏液质，糖类和微量生物碱等成分。 牛舌草具有调节异常黑胆质、生湿补脑 、祛寒补心、爽心悦智、 润燥消炎、止咳平喘等功效。是维吾尔医治疗心脑血管疾病的常用药材之一。 研究背景 研究目的 探究从维药牛舌草中提取的总黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤是否具有保护作用 实验分组 观察指标 操作方法 数据处理 研究方法 研究方法——实验分组 以大鼠为研究对象，将大鼠分成以下几组： 非缺血正常对照组(Control group，C组) 缺血再灌注阳性对照组(Ischemia reperfusion grop，I组) BTF低剂量治疗组(Low dosage Astilbin treatment group，L组) BTF中剂量治疗组(Middle dosage Astilbin treatment group，M组) BTF高剂量治疗组(High dosage Astilbin treatment grop，H组) 研究方法——操作方法 建立大鼠心肌缺血再灌注模型： 大鼠麻醉 用3 %戊巴比妥钠(1.0～1.5 mL/kg)腹腔注射，仰卧固定于专用的动物手术台上。 气管切开手术 横向切开皮肤，逐层分离暴露气管，在气管正中倒“T”切口，置入气管导管并固定。 心肌缺血及再灌注 对大鼠骨左缘第3肋间0.5 cm处剃毛,纵向剪开长约1.5 cm皮肤组织,用止血钳分离肌肉组织，在第二三或者三四根肋骨处开口，打开胸腔后连接呼吸机，连好后在开胸的肋骨处开直径约5 mm的孔，掏出心脏，大鼠心脏左前冠状动脉降支结扎，放回心脏并胸腔排气，闭合伤口。缺血30 min后，再次掏出心脏，剪开结扎线，放回胸腔，排气后夹毕伤口再灌注2 h，术毕，腹主动脉取血并摘取心脏备用。 判断模型构建成功与否指标： 结扎后： 大鼠心脏左前冠状动脉降支结扎，心脏表面相应区域颜色变暗、ST段弓背抬高或与高耸的T波形成单向曲线，QRS波电压增高或(且)波幅增宽表明缺血成功 灌注时： 心电图 ST段下降1/3以上、心脏表面变红、ST段及 T波下落，QRS波趋于术前表明心肌组织恢复再灌注。 研究方法——观察指标 心电图改变　手术前稳定10 min后正式记录一段大鼠II导联心电图作为用药前对照，手术中连续记录至再灌注后，再灌注2h后再次记录大鼠II导联心电图，读取J 点反映 ST 段变化进行统计。 心肌梗死面积的计算 心梗面积百分比＝(梗死区面积/心室区总面积)×100 % 血清中 AST含量的测定 心肌缺血造模成功后，首先缺血30min，然后再灌注2h，最后经腹主动脉取血，3000 r/min离心10 min后取血清，根据检测试剂盒要求，通过紫外可见分光光度计510nm波长处，平行测定各组大鼠血清中AST含量。 CK含量的测定 对进行了心肌缺血再灌注的SD大鼠的血液进行离心，得到上层血清，并对血清中的肌酸激酶活力进行测定。按照肌酸激酶试剂盒说明书给定的方法依次进行。按CK试剂盒说明书所提供的方法进行。用酶标仪在340nm波长下测定吸光度（OD值），通过试剂盒上提供的公式计算样品中大鼠肌酸激酶(CK)浓度。 LDH测定 探究牛舌草总黄酮对SD大鼠心肌缺血再灌注的保护作用，通过结扎冠状动脉左前降支30min，至使大鼠心肌缺血，紧接着再灌注2h。取出血液，在3000r/min条件下离心10min,取上清液血清并对血清中的LDH进行检测，按照LDH试剂盒说明书提供的方法进行。用酶标仪450nm波长下测定吸光度，通过说明书上提示的方法计算乳酸脱氢酶活性。 研究方法——数据处理 采用SPSS 18.0软件进行数据的录入与分析，各项数据均以平均数表示，以P0.05为差异有统计学意义。 研究结果一 图1.心肌缺血前心电图 图2.心肌缺血后心电图 组别 剂量 （mg/kg） 缺血前 (mv) 缺血后(mv) 再灌注（mv） 15min 30min 30min 60min 假手术组 0 0.128±0.034 0.378±0.028 0.394±0.031 0.157±0.042 0.