环孢素A对小鼠早期胚胎体外发育的影响-妇产科学专业论文.docxVIP

 例则他 原创性声明 本人郑重声明:所呈交的学位论文，是本人在导师的指辱下，独立进行研 究所取得的成果。除文中已经注明引用削内容外，本论文不包含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出囊要贡献的个人和集 体，均已在文中以明确方式标明。本声明的活律责任由本人承担。 阳文怖攘 日期: )IV l 阳明 学位论文使用授权声明 本人在尊师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。 根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部 门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅:本人授权郑州 大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印: 缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校启发表、使用学 位论文戚与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑 州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。 学位论文作者:加可 日期:vO{-o 年华月w 日 俨一一-.町..  摘要 环抱索 A 对小鼠早期胚胎体外发育的影晌 研究生:茹改珍 导师:黄元，华孙萤瑛 郑州大学第一附属医院 生殖医学中心 中国郑州-1 450052 摘要 目前体外受精一胚胎移植(In vitro ferti1ization and embryo transD町， IVF-ET) 的胚胎种植率低。胚胎植入是 IVF-ET 技术临床娃报的关键，而着床前的胚胎发 育一定程度上决定了胚胎的植入潜能。为改善娃娘结局，生殖阪学临床在不断 改进超促排卵方案以求获得高质量卵子的同时，胚胎实验室也在不断探索胚胎 体外发育的合适条件及有利因素。 环抱素 A(Cyclosporin A，CsA)是一种免疫抑制剂，广泛用于器官移植后免疫 排斥反应和免疫性疾病的防治。研究显示，合适剂量的 CsA 不仅能诱导母胎界 面及外周的免疫耐受，还能促进人早孕期绒毛滋养细胞增殖、抑制滋养细胞凋 亡，增强其运动、迁移和侵袭能力从而对姥娘起到双意调节作用。绒毛细胞滋 养细胞来源于胚胎滋养叶细胞，除滋养细胞外 CsA 尚对多种细胞的生长具有调 节作用，故推测 CsA 可能在植入前的胚胎发育中发挥作用。 目的 本研究通过观蛮不同时期添加 CsA剌激加不同浓度 CsA的培养基中2细胞胚 胎体外培养的发育情况，探讨 CsA对植入前胚胎发育的影响及越始阶段和有利于 早期胚胎发育的最佳剂量。国在探索体外受精帽胚胎移植(In vi忧。 ferti1ization and embryo trans?町， IVF-ET) 中改善胚胎质量，提高胚胎种植潜能的有效途径。 方法 L 4周龄ICR雌鼠实验前超促排卵，自然交配。实验当天解剖小鼠，收集 2 细胞胚胎。所获胚胎同等级别均分为几个实验组， N?裂液(cleavage medium ，CM) 摘要 和囊脏液(bl邸tocyst medium ，BM)序贯培养，每天观察胚胎发育至囊胚孵出。 υ 2. 观察从不同时期添加 1μmollLCsA对小鼠胚胎体外发育的影响。胚胎共分 三组培养， 2细胞期加入 CsA 组、桑榷胚期加入 CsA 组和未加CsA 组(对照组〉。 观察各期胚胎发育情况。 3. 观察不同浓度 CsA对小鼠胚胎体外发育的影响。胚胎共分四组培养，培 养基分别添加 10、1、0.1、 0μmollL CsAo 观察各组囊胚形成及孵出情况。 4. 扩张期囊胚总细胞计数。采用 Hoechst 33258 荧光染色，荧光显微镜下 计数。 5. 统计方法:采用 SPSSI3.0统计学软件对实验数据进行统计学分析。定性 资料采用卡方检验:定最资料采用方建分析。 α=0.05为检验水准 ，P0.05 为装异 有显著性。 结果 1.从不问时期添加 l J.1mollL的 CsA 对早期胚胎发育的影响 2 细胞期加入 CsA ，桑甚胚加入CsA 和米加入 CsA 组(对照组)，三组胚胎 4-8 细胞胚胎形成率分别为 71.9%、62.5% 和 63.6%; 桑葱胚形成率分别为 70.8%、62.5% 和 62.5%; 囊胚形成率分别为 62.9% 、58% 和 53.4%;囊胚孵 出率分别为 37.5%、25.5% 和 21.3%，差异均无显著性 (P0.05)。 2. 不同浓度 CsA 对早期胚胎发育的影响 10、1、0.1、OJ.1mol/LCsA 组，总囊胚形成率分别为 82.1%、73.6%、70.7% 和 71.3%，差异无统计学意义 (P0.05); 扩张期囊胚形成率分为 65.5%、50.6%、 47.7%和 48.2% ，除10 J.1mollLCsA 组与其它三组比较提异有显著性外 (P0.05)， 其余各组比