放射药理学_核技术在药学领域的应用.pptVIP

分子杂交技术在医学中的应用 (一)遗传性疾病的诊断和产前诊断： 即基因诊断法(Gene Diagnosis) 。 1. 用基因探针直接分析遗传病的基因缺陷： 例如，限制酶MstⅡ识别顺序为CCTGAGG，正常血红蛋白的 βA珠蛋白基因中包含这一顺序，经MstⅡ作用后产生1．15kb和0．2kb两个片段．镰状细胞贫血者因其谷氨酸密码子GAG突变为缬氨酸密码子GTG，失去这个MstⅡ限制酶切点，产生1.35kb的片段，据此可作诊断。 2．用基因探针间接分析与DNA多态紧密连锁的遗传病： 在人类遗传物质中已经发现有800个区域，它们在各个体间DNA顺序是不相同的，因此经限制酶切割后会形成不同长度的DNA。如果将DNA在凝胶中分离，用基因探针就会得到不同的片段模型，这种模型按孟德尔规律遗传，称为限制性片段长度多态性(Restriction FragmentLength Polymorphisms简称RFLP)．若一多态区位于缺陷基因附近，很可能随缺陷基因一起遗传。所以分析DNA多态性可帮助诊断基因缺陷。 (二)DNA指纹图谱在法医学上的应用： Wyman和White在人体DNA基因库中的随机片段里发现串联重复的小卫星区域。人类小卫星DNA中有一个10～16个碱基的常见“核心”顺序，用串联重复的核心顺序做成探针，对限制酶消化后的人DNA作Southern印迹分析，可定出这些小卫星DNA的长度。该长度有高度多态性，表现在个体间有极高的特异性，就是在孪生子之间也能找到显著的差异，因而高度可变小卫星区域所得的限制性内切酶片段又称DNA指纹图谱。 “指纹图”具有体细胞和生殖细胞系稳定性，法医甚至可用指纹图对血痕(相当于60ul血液)或精液斑(相当于5ul精液)作出分析，为法医学中的亲子鉴定和个人识别提供了极有用的手段。 (四)致病微生物检测：不能分离培养或很难培养的致病微生物如淋球菌，巨细胞病毒、单纯疱疹病毒、腺病毒、乙型肝炎病毒、乳头瘤病毒和产生肠毒素的大肠杆菌等，可通过分子杂交来鉴定。致病微生物杂交还可用于流行病调查。 以HBV的DNA作探针与病人血清作打点杂交，可以随时了解病人体内乙型肝炎病毒是否仍在繁殖。如与肝组织杂交则可了解病毒基因是否整合。 在AIDS病研究中的应用：应用组织切片原位杂交检测组织中是否存在AIDS病毒特有的HIV序列，可以确定感染细胞和组织的范围。原位杂交结合免疫细胞化学检测特异性细胞抗原，有助于进一步确定和显示HIV感染细胞的特性。 Molecular Imaging The use of non-invasive imaging technologies on the assays of cellular/molecular events in living organisms. Provide better methods for the study of biological processes as well as the diagnosis and management of diseases. Imaging Molecular Processes in Living Animals Objectives of Small Animal Imaging: Study of Human Diseases on Animal Models Development of New Probes for diagnosis and new Agents for Therapy Drug Discovery and Pre-Clinical Testing Investigation of Molecular Processes in biology Investigation of Gene Expression mechanisms Example of Brain Study: Study of tumor metabolism in mouse: Example ofBiodistribution: Study of Innovative Radiotracers Brain tumor study: FDG F-Choline PET Study of Tumor in Rat Dijon – January 2005 Tumor model: MAT-Ly-Lu – Prostatic tumor (subcutaneous) Rat weight: 250g – Position: prone/left side down, head forward Tumor mass Tumor mass [18F]-FDG Activity =189.5 ?Ci Uptake time